[发明专利]用于检测细菌性阴道炎的培养液、试剂盒及检测方法

说明书

技术领域

本发明属于微生物诊断技术领域，具体涉及一种用于检测细菌性阴道炎的培养液、试剂盒及检测方法。

背景技术

目前对细菌性阴道炎的检测以传统方法为主，常用镜检观察，金标准方法是培养、分离鉴定，但步骤复杂、检测周期长，分离率不高，整个过程大约4-7天，操作繁琐，已不能满足快速、便利检测的需要，而且当样本中杂菌较多时会影响真正目标菌的识别。

传统培养基基本上都是使用CDC厌氧琼脂培养基，其采用琼脂作为凝固剂适合固体平板培养，但其营养成分复杂，培养时间长，需要24～48小时，临床使用不便，不适合细菌性阴道炎感染的加特纳菌等厌氧菌培养；且不具备靶向培养功能，常有较多杂菌生长，对下一步菌落筛选操作造成较大障碍，菌落需人工挑选培养后再纯化鉴定，对操作人员素质要求较高，步骤较繁琐。使用前需要灭菌消毒再倒成平皿板，步骤复杂，成品平皿只能保存温度在2-8℃，且有效期只有7天；同时，传统药敏检测方法必须在病原体分离鉴定后才能分别做每种药物敏感性试验，对培养基的质量有一定要求，如厚度、表面湿度硬度等均会影响药物迁移，抑菌圈测量工作精度与操作人员主观意识有关，判断范围较大，易产生人为误差，整个实验过程复杂，时间长，需要48-72小时，且鉴定过程要求人员素质高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种营养成分高，培养时间短，具有靶向培养功能，且不需将病原体分离鉴定即可同时用于细菌性阴道炎检测及药敏检测的培养液、试剂盒及检测方法。

本发明的一种用于检测细菌性阴道炎的培养液，其中每100ml培养液中，含有如下重量配比的组份：

牛心粉 0.1～1g

胰蛋白胨 0.5～5g

葡萄糖 0.1～2g

氯化钠 0.1～1g

溴甲酚紫钠盐 0.1～1g

马血清 5～20ml

硫酸新霉素 0.0001～0.001g

制霉菌素 0.0001～0.001g。

上述所述用于检测细菌性阴道炎的培养液的制备方法，其是向含有牛心粉、胰蛋白胨、葡萄糖、氯化钠和溴甲酚紫钠盐的混合物中加灭菌纯化水混溶，高压灭菌，然后加入马血清、硫酸新霉素和制霉菌素，即得培养液。

本发明的一种用于检测细菌性阴道炎的试剂盒，包括干粉培养基、培养基稀释液和药敏板，所述干粉培养基是本发明上述所述培养液的冻干粉，所述药敏板上设有培养置物台、阴性对照孔C^-、阳性对照孔C⁺、若干组药物试验孔，每组所述药物试验孔分为高浓度药物孔和低浓度药物孔。

上述所述培养基稀释液为灭菌纯化水。

本发明的一种检测细菌性阴道炎的检测方法，其是采用本发明上述 所述的试剂盒。

本发明提供的检测细菌性阴道炎的检测方法，包括下述步骤：

(1)药敏板的药物试验孔中预先包被各种高低浓度药物溶液；

(2)用培养基稀释液将干粉培养基稀释成液体培养基，汲取少量液体培养基到药敏板的阴性对照孔C^-；

(3)用无菌棉拭子取疑似细菌性阴道炎病人生殖道分泌物，生理盐水稀释后，汲取少量到剩余液体培养基中混匀成菌液；

(4)分别汲取少量菌液到药敏板的阳性对照孔C⁺、各药物试验孔中，将药敏板盖上盖子恒温培养，6-24h观察结果；

(5)检测结果判读：

孔C⁺培养基与孔C^-相比变黄色，为阳性(+)；

孔C⁺培养基与孔C^-相比不变色，为阴性(—)；

孔C^-阴性(—)，孔C⁺阳性(+)试验有效，判断余下各孔结果；

孔C^-阳性(+)，表示污染，试验无效；

孔C^-阴性(—)，孔C⁺阴性(—)表明阴性结果，余下孔不判断结果；

(6)药敏结果判定：

孔A(—)孔B(—)敏感，

孔A(—)孔B(+)中敏，

孔A(+)孔B(+)耐药。

作为优选，本发明的一种用于检测细菌性阴道炎的培养液，其中每100ml培养液中，含有如下重量配比的组份：

牛心粉0.1～0.6g

胰蛋白胨 1～4g

葡萄糖 0.5～1.5g

氯化钠 0.5～1.5g