[发明专利]一种促进出根的甘草组织培养方法

说明书

技术领域

本发明属于甘草组织培养技术领域，尤其涉及一种促进出根的甘草组织培养方法。

背景技术

甘草，（学名：Glycyrrhiza uralensis Fisch）别名：国老、甜草、乌拉尔甘草、甜根子。豆科、甘草属多年生草本，根与根状茎粗壮，是一种补益中草药。对人体很好的一种药，药用部位是根及根茎，药材性状根呈圆柱形，长25～100厘米，直径0.6～3.5厘米。外皮松紧不一，表面红棕色或灰棕色。根茎呈圆柱形，表面有芽痕，断面中部有髓。气微，味甜而特殊。功能主治清热解毒、祛痰止咳、脘腹等。喜阴暗潮湿，日照长气温低的干燥气候。甘草多生长在干旱、半干旱的荒漠草原、沙漠边缘和黄土丘陵地带。根和根状茎供药用。传统的甘草获取方法是采挖叶生植物资源，造成水土流失和严重土壤沙漠化。另外，甘草种子主要来自野生甘草，其品种混杂，种子稀缺，发芽率极低，野生资源不适应规模化和标准化生产的需要。同时由于人们破坏性地对叶生甘草采挖，使野生植物几乎灭绝，对甘草的保护性利用迫在眉睫，但由于甘草种植发芽率不高和人们对其此生代谢物的需求，从而使甘草的组织培养对研究和生产具有重要作用，目前的甘草培养基的生根效率不高，不能满足需求。

稀土元素是17种特殊的元素的统称，它的得名是因为瑞典科学家在提取稀土元素时应用了稀土化合物，所以得名稀土元素。然而稀土是历史遗留下来的名称，稀土是从18世纪末开始陆续发现，当时人们常把不溶于水的固体氧化物称为土，例如，将氧化铝称为“陶土”，氧化钙称为”碱土“等。稀土一般是以氧化物状态分离出来的，当时比较稀少，因而得名为稀土（Rare Earth，简称RE或R），然而经过大量的科学研究，在组织培养当中添加了稀土元素会大大地提高组织培养的质量。

镧是一种金属元素，原子序数57，原子量138.9055，元素名来源于希腊文，原意是“隐蔽”。银灰色光泽，质地较软，密度6.174g/cm3，熔点921℃，沸点3457℃；化学性质活泼，暴露于空气中很快失去金属光泽生成一层蓝色的氧化膜，但是它并不能保护金属，继而进一步氧化生成白色的氧化物粉末。能和冷水缓慢作用，易溶于酸，可以多种非金属反应。金属镧一般保存于矿物油或稀有气体中。镧在地壳中的含量为0.00183%，在稀土元素中含量仅次于铈。

发明内容

基于现有技术存在上述问题，本发明提供一种促进出根的甘草组织培养方法，其以1/2MS培养基为基础培养基，调整了培养基中激素配方和添加了稀土元素，并在增值培养当中添加增强颜色光源，极大地提高了甘草增殖苗的出根率，本发明具有出根率高的优点。

一种促进出根的甘草组织培养方法，其包括以下步骤：

步骤S10，按以下配方配制培养基：以1/2MS培养基为基础培养基，添加阿司匹林溶液的体积分数是为0.03%、NAA（萘乙酸）的浓度为0.05mg/L、ZT(玉米素)的浓度为2.0 mg/L、硝酸镧的浓度为3g/L，维生素B₁₂的浓度为0.3mg/L，琼脂粉的浓度为10g/L、白砂糖的浓度为7g/L；

步骤S20，选择生长正常和健康的甘草增殖组培苗芽，在超净工作台中将甘草增殖组培苗芽非正常部分切除，将甘草增殖组培苗芽用手术刀分开成单株，并接种到装有步骤S10配制好的培养基的组培瓶中，并转移到组培室中；

步骤S30，将组培室中的环境温度调整为27℃～31℃，使用2000lux光照强度的自然光、蓝光增强光源和红光增强光源照射甘草增殖组培苗芽，光照时间为光照16小时/黑暗8小时。

优选地，所述的步骤S10中还包括步骤S11，对培养基进行121℃的高温蒸汽灭菌20分钟。

优选地，所述的步骤S30中的增强光源是LED灯，红色增强光源是红色LED灯，蓝色增强光源蓝色LED灯。

优选地，所述的步骤S50中的红色光源是波段为650nm-700nm的红光，蓝色光源是波段为450nm-470nm的蓝光。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的描述。

一种促进出根的甘草组织培养方法，其包括以下步骤：

步骤S10，按以下配方配制培养基：以1/2MS培养基为基础培养基，添加阿司匹林溶液的体积分数是为0.03%、NAA（萘乙酸）的浓度为0.05mg/L、ZT(玉米素)的浓度为2.0 mg/L、硝酸镧的浓度为3g/L，维生素B₁₂的浓度为0.3mg/L，琼脂粉的浓度为10g/L、白砂糖的浓度为7g/L；