[发明专利]中性粒细胞弹性蛋白酶测定试剂及其制备方法在审
| 申请号： | 201710171775.9 | 申请日： | 2017-03-22 |
| 公开（公告）号： | CN108627642A | 公开（公告）日： | 2018-10-09 |
| 发明（设计）人： | 吴朝晖 | 申请（专利权）人： | 苏州普瑞斯生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/543 | 分类号： | G01N33/543 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 215000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 中性粒细胞弹性蛋白酶 胶乳微球 测定试剂 亲和素化 人中性粒细胞弹性蛋白酶 缓冲剂 生物素化 校准试剂 稳定剂 抗体 制备 全自动生化分析仪 反应促进剂 高通量检测 准确度 胶乳增强 人体阴道 分泌物 比浊法 符合性 抗原 血清 | ||
1.一种中性粒细胞弹性蛋白酶测定试剂，其特征在于，包括R1试剂、R2试剂、校准试剂；
所述R1试剂包括缓冲剂、反应促进剂、亲和素化胶乳微球、稳定剂，亲和素化胶乳微球的胶乳微球直径为50-100nm，所述R1试剂的PH值为7.4-8.0；
所述R2试剂包括缓冲剂、生物素化抗人中性粒细胞弹性蛋白酶抗体、稳定剂；
所述校准试剂包括定量的中性粒细胞弹性蛋白酶抗原。
2.根据权利要求1所述的中性粒细胞弹性蛋白酶测定试剂，其特征在于，所述R1试剂中的反应促进剂包括聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇2000中的一种或多种，稳定剂为明胶、乳清蛋白、抗坏血酸中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的中性粒细胞弹性蛋白酶测定试剂，其特征在于，所述R2试剂中生物素化抗人中性粒细胞弹性蛋白酶抗体的抗人中性粒细胞弹性蛋白酶抗体为鼠抗人中性粒细胞弹性蛋白酶单克隆抗体、羊抗人中性粒细胞弹性蛋白酶单克隆抗体、兔抗人中性粒细胞弹性蛋白酶单克隆抗体中至少一种，或者是鼠抗人中性粒细胞弹性蛋白酶多克隆抗体、羊抗人中性粒细胞弹性蛋白酶多克隆抗体、兔抗人中性粒细胞弹性蛋白酶多克隆抗体中至少一种。
4.根据权利要求1所述的中性粒细胞弹性蛋白酶测定试剂，其特征在于，所述R2试剂中的稳定剂为明胶、乳清蛋白、抗坏血酸中的一种或多种。
5.一种中性粒细胞弹性蛋白酶测定试剂的制备方法，其特征在于，分别制备R1试剂、R2试剂、校准试剂；
所述R1试剂的制备方法包括以下步骤：将缓冲剂、反应促进剂、亲和素化胶乳微球、稳定剂、无机盐、防腐剂与水混合调配为PH值为7.4-8.0的溶液即得；
所述R2试剂的制备方法依次包括以下步骤：
S1、将抗人中性粒细胞弹性蛋白酶抗体在PH8.0-9.0的碳酸氢钠缓冲溶液中，于2-8摄氏度进行至少两次透析，以除去干扰标记反应的杂质；
S2、将透析后的抗人中性粒细胞弹性蛋白酶抗体溶液用pH7.0-7.4的磷酸盐缓冲液稀释到1-2mg/ml，加入过量的生物素，在25摄氏度持续、轻微混合1小时，进行标记反应以制得生物素化抗人中性粒细胞弹性蛋白酶抗体溶液；
S3、将步骤S2所得溶液在pH7.5-8.0的磷酸盐缓冲液中，于2-8摄氏度进行至少两次透析，除去未反应的生物素；
S4、将透析后的生物素化抗人中性粒细胞弹性蛋白酶抗体溶液用缓冲液稀释到目标浓度，并加入稳定剂即得；
所述校准试剂的制备方法包括以下步骤：使用稀释液将中性粒细胞弹性蛋白酶抗原稀释到所需浓度即得。
6.根据权利要求5所述的中性粒细胞弹性蛋白酶测定试剂的制备方法，其特征在于，所述R2试剂的制备步骤S2中的生物素为活化生物素，用超纯水溶解后直接进行标记反应。
7.根据权利要求5所述的中性粒细胞弹性蛋白酶测定试剂的制备方法，其特征在于，所述R2试剂的制备步骤S4中稳定剂为明胶、乳清蛋白、抗坏血酸中的一种或多种。
8.根据权利要求5所述的中性粒细胞弹性蛋白酶测定试剂的制备方法，其特征在于，所述R1试剂的亲和素化胶乳微球中的胶乳微球为单一的粒径，或由不同粒径大小的胶乳微球混合而成。
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