[发明专利]快速检测百合青霉腐烂病致病菌——青霉菌的方法在审
| 申请号： | 201710169018.8 | 申请日： | 2017-03-21 |
| 公开（公告）号： | CN107058524A | 公开（公告）日： | 2017-08-18 |
| 发明（设计）人： | 明军;袁素霞;曹雨薇;徐雷锋;杨盼盼 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100081 北京市海淀区中关*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 快速 检测 百合 青霉 腐烂 致病菌 方法 | ||
【权利要求书】：
1.快速检测百合青霉腐烂病致病菌——青霉菌的方法，包括如下步骤：
(1)病原菌的分离、纯化
(2)CTAB法提取病原菌DNA
(3)通用引物ITS1、ITS4对该病原菌进行PCR扩增，设计种特异性引物对，对该病原菌进行特异性PCR扩增，得到目的片段。
2.根据权利要求1中所述的快速检测百合青霉腐烂病致病菌——青霉菌的方法，其特征在于：
(1)根据青霉菌特异性序列，设计青霉菌的特异性引物对命名为LhP-F/LhP-R，正向引物LhP-F的碱基序列为5′-CGAACTCTGTCTGAAGATTG-3′，反向引物LhP-R的碱基序列为5′-CCGAGGTCAACCTGGATA-3′，目的片段长度为381bp；
(2)用于检测青霉菌的特异性引物对的PCR扩增体系为20μL：模版DNA 2μL，LhP-F 0.5μL，LhP-R 0.5μL，2×Taq PCR Master Mix 10μL，ddH2O 7μL；
(3)用于检测青霉菌的特异性引物对的PCR扩增反应程序为：94℃5min；94℃30s，61℃30s，72℃1min，35个循环；72℃10min。
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