[发明专利]突变型木聚糖酶、其制造方法及用途、以及木质纤维素的糖化物制造方法

权利要求书

1.木质纤维素的糖化物制造方法，包括使木质纤维素原料与热稳定性突变型木聚糖酶接触的步骤，

其中，所述突变型木聚糖酶与由序列号2构成的相对应的野生型木聚糖酶相比较，反应的初速度为70％以上，50℃及24小时的热处理后的木聚糖酶活性与热处理前的木聚糖酶活性相比，为50％以上，

所述突变型木聚糖酶：

(1-1)由在序列表的序列号2记载的氨基酸序列中，第33位的天冬酰胺残基被天冬氨酸残基取代、第36位的甘氨酸残基被精氨酸残基取代、第90位的苏氨酸残基被丝氨酸残基取代、第132位的谷氨酰胺残基被精氨酸残基取代、第154位的亮氨酸残基被甲硫氨酸残基取代、第174位的丝氨酸残基被苏氨酸残基取代、第195位的脯氨酸残基被组氨酸残基取代、第197位的丝氨酸残基被天冬酰胺残基取代、及第217位的甘氨酸残基被谷氨酰胺酸残基取代而得到的氨基酸序列构成，

(2-1)由在序列表的序列号2记载的氨基酸序列中，第30位的异亮氨酸残基被缬氨酸残基取代、第33位的天冬酰胺残基被天冬氨酸残基取代、第36位的甘氨酸残基被精氨酸残基取代、及第154位的亮氨酸残基被甲硫氨酸残基取代而得到的氨基酸序列构成，或

(3-1)由在序列表的序列号2记载的氨基酸序列中，第30位的异亮氨酸残基被缬氨酸残基取代、第59位的丝氨酸残基被苏氨酸残基取代、第154位的亮氨酸残基被甲硫氨酸残基取代、第239位的酪氨酸残基被组氨酸残基取代、及第242位的半胱氨酸残基被丝氨酸残基取代而得到的氨基酸序列构成。

2.如权利要求1所述的木质纤维素的糖化物制造方法，其中，所述突变型木聚糖酶由上述(1-1)的氨基酸序列构成。

3.如权利要求1所述的木质纤维素的糖化物制造方法，其中，所述突变型木聚糖酶由上述(2-1)的氨基酸序列构成。

4.如权利要求1所述的木质纤维素的糖化物制造方法，其中，所述突变型木聚糖酶由上述(3-1)的氨基酸序列构成。

5.如权利要求1所述的糖化物制造方法，其中，所述木质纤维素原料是纸浆。

6.糖化物制造方法，包括如下步骤：

从利用权利要求1所述的糖化物制造方法得到的包含木质纤维素的糖化物的糖化反应液中，回收热稳定性木聚糖酶，和

使回收的热稳定性木聚糖酶与木质纤维素原料接触，而制造糖化物。

7.如权利要求6所述的糖化物制造方法，其中，通过用离心分离或微滤膜将所述糖化反应液固液分离，用超滤膜将分离出的液体超滤，而将木质纤维素的糖化物与所述热稳定性木聚糖酶分离、回收。

8.如权利要求7所述的糖化物制造方法，其中，使利用所述离心分离或微滤膜而固液分离出的固体及用超滤膜回收的热稳定性木聚糖酶与木质纤维素原料接触，来制造糖化物。