[发明专利]复合抗体提取物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种复合抗体提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)制备含面部致病菌的复合抗原，所述面部致病菌包括痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、溶血性链球菌和白色念珠菌；

(2)采用所述复合抗原对鸡进行强化免疫，得到免疫鸡的免疫鸡蛋；

(3)对所述免疫鸡蛋的蛋黄分离纯化，获取粗提物干粉；

(4)将所述粗提物干粉依次通过离子交换柱层析和凝胶过滤层析分离纯化，获得含抗痤疮丙酸杆菌、抗金黄色葡萄球菌、抗绿脓杆菌、抗溶血性链球菌和抗白色念珠菌的复合抗体提取物。

2.根据权利要求1所述的复合抗体提取物的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述制备含面部致病菌的复合抗原包括如下步骤：分别将痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、溶血性链球菌和白色念珠菌在37℃条件下恒温培养，将培养得到的各面部致病菌灭活；将已灭活的痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、溶血性链球菌和白色念珠菌按照质量比20-35:15-20:10-15:20-25:10-15在pH6.0-7.0的0.1M PBS溶液中混合均匀，制得浓度为1.0-2.2mg/mL的菌体混合体溶液，按等体积比例加入弗氏佐剂至所述菌体混合溶液中，高速均质，即得所述复合抗原。

3.根据权利要求2所述的复合抗体提取物的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述面部致病菌还包括大肠杆菌；所述痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、溶血性链球菌、白色念珠菌和大肠杆菌按照质量比为20-35:15-20:10-15:20-25:10-15:10-20的比例混合；

对应地，在步骤(4)中，将所述粗提物干粉依次通过离子交换柱层析和凝胶过滤层析分离纯化，获得含抗痤疮丙酸杆菌、抗金黄色葡萄球菌、抗绿脓杆菌、抗溶血性链球菌、抗白色念珠菌和抗大肠杆菌的复合抗体提取物。

4.根据权利要求1至3任一项所述的复合抗体提取物的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述获取粗提物干粉包括如下步骤：取所述免疫鸡蛋的蛋黄，按蛋黄总体积的3-8倍加入蒸馏水稀释，混匀，调节pH值为5.0-6.0，冷却至4℃，静置10-12h；高速离心15-25min，取上清液超滤并浓缩8-12倍，将质量浓度为12％-16％硫酸钠溶液加入浓缩液中，混匀，再高速离心，取上清液超滤膜过滤除菌，滤液冷冻干燥，即得粗提物干粉。

5.根据权利要求1至3任一项所述的复合抗体提取物的制备方法，其特征在于，在步骤(4)中，所述离子交换柱层析分离纯化的条件为：采用弱碱性阴离子交换层析柱，采用pH6.5-7.0的0.01M PBS缓冲液上样平衡，pH6.5-7.0的0.1M PBS缓冲液洗脱分离纯化；

所述凝胶过滤柱层析分离纯化的条件为：采用Sephadex G200层析柱，采用的洗脱液为pH6.5-7.0的0.1M PBS缓冲液。

6.由权利要求1至5中任一项所述的复合抗体提取物的制备方法制备获得的复合抗体提取物。

7.权利要求6所述的复合抗体提取物在制备具有抗菌祛痘功效的护肤品中的应用。

8.一种抗菌爽肤水，其特征在于，所述爽肤水由以下质量百分比的原料组成：权利要求6所述的复合抗体提取物0.15％-0.3％、生育酚乙酸酯0.2％-1％、甘油2％-8％、三乙醇胺0.3％-2.5％、透明质酸0.02％-0.2％、海藻糖2％-5％、卵磷脂1％-5％、PEG-40氢化蓖麻油0.1％-0.25％、苯氧乙醇0.5％-1.0％、羟苯甲酯0.02％-0.2％、香精0.02％-1％及余量水。