[发明专利]一种植物叶片的预处理方法及二噁英的测定方法

权利要求书

1.一种植物叶片的预处理方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将¹³C-PCDD/Fs内标加入植物叶片样品中，再采用索氏提取法对植物叶片样品进行提取，获得含有二噁英的第一提取液；将碱液和所述二噁英的提取液混合后，在不高于5℃的条件下搅拌15～60min，经离心分离获得含有二噁英的第二提取液；

(2)将步骤(1)所得的提取液浓缩后，进行多层硅胶柱净化，得到净化液，其中，所述多层硅胶柱从下至上的构成组分为：1～3cm柱高的玻璃棉、1～2g无水硫酸钠、5～15g碱性氧化铝、0.2～1g中性硅胶、2～6g33％氢氧化钾硅胶、0.2～1g中性硅胶、15～35g40％硫酸硅胶、15～40g的活性炭-硅胶复合吸附材料；

(3)将步骤(2)所得的净化液经氮吹浓缩，得到仪器分析用净化试样。

2.如权利要求1所述的植物叶片的预处理方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述植物叶片样品为将采集到的植物叶片在-65℃冷冻干燥至恒重，切割成小条，将切成小条的植物叶片与无水硫酸钠混合后研磨去除水分制得，其中，所述切成小条的植物叶片与所述无水硫酸钠的质量比为0.5～2:1。

3.如权利要求1所述的植物叶片的预处理方法，其特征在于，所述步骤(1)中，采用索氏提取法对植物叶片样品进行提取的步骤，具体包括：

采用索氏提取法对所述的植物叶片样品进行提取，获得含有二噁英的第一提取液；其中，所述索氏抽提的条件为：温度为60～80℃，时间为12～18h，试剂包括丙酮、二甲基亚砜、甲苯、正己烷、二氯甲烷中的一种或多种。

4.如权利要求1所述的植物叶片的预处理方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述碱液包括氨水溶液、氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液中的一种或多种。

5.如权利要求1所述的植物叶片的预处理方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述碱液的浓度为1～3％，所述碱液的温度不超过10℃。

6.如权利要求1所述的植物叶片的预处理方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述植物叶片样品与所述碱液的质量体积比为1:0.2～0.5(g/mL)。

7.如权利要求1所述的植物叶片的预处理方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述多层硅胶柱从下至上的构成组分为：1～3cm柱高的玻璃棉、1.5g无水硫酸钠、8g碱性氧化铝、0.5g中性硅胶、4g33％氢氧化钾硅胶、0.5g中性硅胶、20g40％硫酸硅胶、25g活性炭-硅胶复合吸附材料。

8.如权利要求1所述的植物叶片的预处理方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述将步骤(1)所得的提取液浓缩后，进行多层硅胶柱净化，得到净化液之前，还包括：

用第一淋洗液浸润多层硅胶柱后，用空气泵赶尽所述多层硅胶柱柱内的气泡后，采用第一淋洗液对所述的多层硅胶柱进行预淋洗。

9.如权利要求1所述的植物叶片的预处理方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述将步骤(1)所得的提取液浓缩后，进行多层硅胶柱净化，得到净化液的步骤，具体包括：

在所述多层硅胶柱下放置锥形瓶，将多层硅胶柱的柱管和接液槽用连接器连接起来，将盛有第二淋洗液的分液漏斗固定在所述接液槽上，用滴管将浓缩后的提取液转移至所述多层硅胶柱中，静置15～30min；打开所述分液漏斗的阀门，调节淋洗速度，使得所述分液漏斗内的第二淋洗液以1～10d/s的速度滴下；第二淋洗液流尽，关闭所述分液漏斗和多层硅胶柱的阀门；向所述分液漏斗中倒入第三淋洗液，打开所述分液漏斗的分液漏斗阀门，调节淋洗速度，使得所述分液漏斗内的第三淋洗液以1～10d/s的速度滴下，待对所述多层硅胶柱洗脱完毕后，将所述锥形瓶取下，所述锥形瓶中所收集的为净化液。

10.一种植物叶片中二噁英的测定方法，其特征在于，包括如下步骤：

取如权利要求1～9中任一所述的植物叶片的预处理方法获得的净化试样，采用同位素稀释高分辨气相色谱-高分辨质谱联用仪对所述净化试样进行仪器分析测定，得出植物叶片中二噁英含量的测定结果。