[发明专利]全血中阿比特龙的定量检测方法

权利要求书

1.全血中阿比特龙的定量检测方法，其特征是：以全血作为待测对象，依次进行以下步骤：

1)、吸取全血裂解液0.4mL于带盖容器中，加入乙酸乙酯3mL，振荡器漩涡2±0.2min，8000±500r/min高速离心5±0.5min，分别得位于上层的乙酸乙酯层、位于下层的残渣；

在残渣中加入2mL乙酸乙酯重复上述振荡器漩涡、高速离心；

合并两次离心所得的乙酸乙酯层；于45±1℃水浴中氮气流吹干，所得的干燥物用0.2mL的20％乙腈水溶液复溶，漩涡混匀1±0.2min，18000±500r/min高速离心5±0.5min后，吸取上清液Ⅰ；

2)、称取碱性硅藻土4g放入玻璃层析柱中，振动处理5±0.5min；

3)、然后将步骤1)中的上清液Ⅰ全部加入步骤2)的玻璃层析柱中，先用5mL纯水洗脱，然后用20％甲醇水溶液5mL洗脱；最后用5mL色谱甲醇洗脱，收集色谱甲醇所对应的全部洗脱液，于45±1℃水浴中氮气流吹干，干燥物用0.2mL的20％乙腈水溶液复溶，漩涡混匀1±0.2min，18000±500r/min高速离心5±0.5min后，吸取上清液Ⅱ进行后续的高效液相色谱系统分析；

4)、色谱柱采用Thermo Hypersil BDS C18色谱柱(3μm,250mm×4.6mm)；流动相为乙腈-水-0.01M磷酸二氢钠＝60:5:35(v/v)，流速1.0mL/min，柱温40℃，紫外检测波长254nm，进样量20μL；

5)、以步骤4)所得的阿比特龙药物峰面积为Y，代入公式Y＝27524X+1956.6中，从而获得步骤3)所得的上清液Ⅱ中的阿比特龙浓度X，该X的单位为μg/ml；

然后经换算，得待测全血中的阿比特龙浓度。

2.根据权利要求1所述的全血中阿比特龙的定量检测方法，其特征是：所述步骤1)中的全血裂解液的制备方法为：在全血中加入等体积的细胞裂解液均匀震荡，得全血裂解液。

3.根据权利要求2所述的全血中阿比特龙的定量检测方法，其特征是：所述步骤1)中：于100±10r/min震荡5±0.5分钟。

4.根据权利要求1～3任一所述的全血中阿比特龙的定量检测方法，其特征是：待测全血中的阿比特龙浓度为X。

5.根据权利要求4所述的全血中阿比特龙的定量检测方法，其特征是：

所述细胞裂解液的配方为：氯化铵8.29g、碳酸氢钾1g和EDTA-2Na 37.2mg，溶于1000mL超纯水中。