[发明专利]一种多杀菌素半抗原及其制备方法和应用有效
| 申请号: | 201710158823.0 | 申请日: | 2017-03-17 |
| 公开(公告)号: | CN106967140B | 公开(公告)日: | 2019-07-09 |
| 发明(设计)人: | 韩谦;赵洪伟;兰坚强;范咏梅;刁晓平 | 申请(专利权)人: | 海南大学 |
| 主分类号: | C07H17/08 | 分类号: | C07H17/08;C07H1/00;C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K16/44;G01N33/535;G01N33/52 |
| 代理公司: | 深圳市千纳专利代理有限公司 44218 | 代理人: | 李平 |
| 地址: | 570228 *** | 国省代码: | 海南;46 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 杀菌 半抗原 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种多杀菌素半抗原,其特征在于,其分子结构式为:
2.一种如权利要求1所述的多杀菌素半抗原的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1,取多杀菌素,加入0.8-1.2N硫酸中,75-85℃反应完全,纯化,得到C-17-多杀菌素,其分子结构式如式(2)所示,其中多杀菌素、硫酸的用量比为:1g︰10-20mL;
步骤2,取C-17-多杀菌素,加入二氯甲烷溶解,加入丁二酸酐、4-二甲氨基吡啶,室温反应完全,纯化,得到权利要求1所述的多杀菌素半抗原,其中,C-17-多杀菌素、丁二酸酐和4-二甲氨基吡啶的用量比为:600mg︰100-750mg︰12.2-122mg,
3.一种多杀菌素抗原,其特征在于,由权利要求1所述的多杀菌素半抗原与载体蛋白偶联得到,其分子结构式为:
4.一种制备如权利要求3所述的多杀菌素抗原的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤a,取权利要求1所述的多杀菌素半抗原,加入无水二甲基甲酰胺混匀后,加入二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺,室温反应过夜,其中,多杀菌素半抗原、二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺的用量比为:0.09mmol︰0.09-0.18mmol︰0.09-0.18mmol;
步骤b,离心,取溶液,将溶液缓慢加入载体蛋白溶液中,所用载体蛋白的量按照半抗原与载体蛋白的摩尔比15-40︰1计;
步骤c,反应完全后,透析,得到多杀菌素抗原。
5.一种多杀菌素抗体,其特征在于,由权利要求3所述的多杀菌素抗原免疫动物制备得到。
6.由权利要求5所述的多杀菌素抗体制备的多杀菌素酶联免疫试剂盒。
7.权利要求1所述的多杀菌素半抗原或权利要求3所述的多杀菌素抗原在制备多杀菌素抗体中的应用。
8.权利要求5所述的多杀菌素抗体或权利要求6所述的多杀菌素酶联免疫试剂盒在检测动物源性食品中多杀菌素残留的应用。
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