[发明专利]一种同时分析分离甲磺酸瑞波西汀苏式异构体及硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种高效液相色谱方法，具体涉及一种同时分析分离甲磺酸瑞波西汀苏式异构体及硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物的方法。

背景技术

甲磺酸瑞波西汀由Pharmacia&Upjolm公司开发，于1977年在英国首次上市，目前在欧盟、美国等世界40多个国家上市，也是第一个上市用于治疗抑郁症的选择性去甲肾上腺素(NA)再摄取抑制剂。甲磺酸瑞波西汀对去甲肾上腺素再摄取抑制作用有高度的选择性，对其他神经递质和受体几乎没有影响，能增强去甲肾上腺素在突触的有效性，减少去甲肾上腺素的传导。临床研究表明，本品治疗抑郁症，尤其是重抑郁症相当有效，同时耐受性良好，不良反应少。进入二十一世纪后，随着人们生活节奏日益紧张，抑郁症人群日益增多，甲磺酸瑞波西汀作为治疗抑郁症药物的应用也日益广泛。

甲磺酸瑞波西汀，化学名：[(2-乙氧基苯氧基)苯甲基]吗啉甲磺酸盐，其化学结构式如下：

甲磺酸瑞波西汀分子中有两个不同的手性中心，所以它有四个光学异构体。其中，具有抗抑郁活性的是一对赤式消旋体(2R，3R)、(2S，3S)，本文所指主成分甲磺酸瑞波西汀即指具有抗抑郁活性的赤式消旋体。而其苏式异构体(2R，3S)、(2S，3R)却并无抗抑郁活性。瑞波西汀四个异构体结构如下：

在甲磺酸瑞波西汀原料合成过程中，由于国内各企业合成工艺路线及工艺水平不同，难免产生苏式异构体副产物及其他中间体杂质，如硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物等，因此，控制甲磺酸瑞波西汀中苏式异构体及相关中间体杂质含量，是控制甲磺酸瑞波西汀质量的关键。

发明内容

本发明的目的在于提供一种同时分析分离甲磺酸瑞波西汀苏式异构体及硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物的方法，该分析分离方法能同时将苏式异构体及硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物分析分离，从而保证甲磺酸瑞波西汀的质量。

为达到上述目的，本发明的基础方案如下：

一种同时分析分离甲磺酸瑞波西汀苏式异构体及硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物的方法，采用高效液相色谱仪，以0.01mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇为第一流动相，以甲醇为第三流动相，采用梯度洗脱，梯度洗脱程序如下：

(1)在0-20min内，采用第一流动相进行洗脱；

(2)在20-38min内，采用第一流动相、第三流动相进行洗脱，第一流动相的比例连续、均匀地从100％开始减少，第三流动相的比例连续、均匀地从0％开始增加，最终使第一流动相、第三流动相的体积比为0.9-1.1:5；

(3)在38-43min内，采用第一流动相、第三流动相进行洗脱，所用的第一流动相、第三流动相的体积比为0.9-1.1:5；

(4)在43-43.1min内，采用第一流动相、第三流动相进行洗脱，第一流动相的比例连续、均匀地增加至100％，第三流动相的比例连续、均匀地降至0％；

(5)在43.1-53min内，采用第一流动相进行洗脱。

按体积计，第一流动相中磷酸二氢钾溶液/甲醇为50-55:48；梯度洗脱的流速为0.9-1.1ml/min。

经梯度洗脱后进行检测，具体操作步骤如下：

(1)配制供试品溶液：取甲磺酸瑞波西汀样品，加第一流动相溶解并稀释制成每1ml中含甲磺酸瑞波西汀1-1.2mg；

(2)配制对照溶液：量取供试品溶液1ml，用第一流动相将供试品溶液稀释至100ml，即为对照溶液；

(3)配制对照品溶液：取甲磺酸瑞波西汀苏式异构体对照品及硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物对照品各适量，分别加第一流动相溶解，稀释制成每1ml中含苏式异构体5-6μg，硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物3μg的溶液，即为对照品溶液；

(4)配制系统适用性溶液：取甲磺酸瑞波西汀对照品、苏式异构体对照品及硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物对照品各适量，分别加第一流动相溶解，分别稀释制成每1ml中含甲磺酸瑞波西汀1-1.2mg，苏式异构体5μg，硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物3μg的溶液，即为系统适用性溶液；

(5)量取系统适用性溶液20μl注入液相色谱仪，观察甲磺酸瑞波西汀峰、苏式异构体峰、硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物峰之间的分离度，理论板数按甲磺酸瑞波西汀峰计算应不低于1000；

(6)量取供试品溶液、对照溶液与对照品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。