[发明专利]白桦BpSPL9基因及其编码蛋白和应用

说明书

白桦BpSPL9基因及其编码蛋白和应用，它涉及一种白桦BpSPL9基因及其编码蛋白和应用。其目的是提供一种白桦BpSPL9基因及其编码蛋白和应用。白桦BpSPL9基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：1所示；氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO：2所示。该基因可以增强植物的抗逆境胁迫能力。利用根瘤农杆菌介导的叶盘转化法，进行白桦的遗传转化，并对获得的转基因白桦株系进行了耐盐性和抗旱性分析，结果显示，白桦BpSPL9基因能够提高白桦的抗盐、耐旱能力。通过本发明可培育出抗盐、抗旱的转BpSPL9基因的白桦新品种，本发明应用于林木分子育种领域。

技术领域

本发明涉及白桦BpSPL9基因及其编码蛋白和应用。

背景技术

转录因子(transcription factor，TF)也称反式作用因子，是指那些具有同真核基因启动子区域中顺式作用元件发生特异性结合，或是结合已知DNA结合域结构特征的蛋白质分子，具有激活或抑制基因转录效应的功能。高等植物中的转录因子数量大、种类多且转录调控较为复杂，转录因子的研究日益受到人们的广泛关注。目前相继从高等植物中分离出了大量调控干旱、高盐、低温、激素、病原反应及生长发育等相关的转录因子。

典型的植物转录因子一般包含有4个功能区，即DNA结合域(DNA-bindingdomain)、转录调控域(transcription regulation domain)包括激活和抑制域、寡聚化位点(oligomerization site)以及核定位信号(nuclear localization signal)。但不同的转录因子可能缺少某一功能区，如特异的DNA结合域或转录调控域，转录因子通过这些功能区域，在特定的时间进入细胞核内与启动子顺式作用元件或与其他转录因子的功能区域相互作用来调控基因的转录表达。

近年来生物技术的发展以及分子育种研究的兴起，为利用基因工程手段改良林木、加速林木新品种的选育奠定基础。白桦是我国东北与内蒙古地区重要的造林树种，是优良的短周期阔用材树种，传统的育种手段难以在短期内实现林木性状改良的需求，通过转基因手段对其进行遗传改良具有很大意义。

发明内容

本发明提供一种白桦基因及其编码蛋白和应用。

本发明白桦BpSPL9基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：1所示。

本发明编码白桦BpSPL9基因的蛋白的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO：2所示。

本发明白桦BpSPL9基因的应用是指在增强植物的抗逆境胁迫能力上的应用。

本发明公开了白桦BpSPL9基因及其编码蛋白和应用，本发明构建一种含有BpSPL9基因的植物表达载体，该载体使用了花椰菜花叶病毒(CaMV35S)启动子，并加入了选择性标记卡那霉素。利用根瘤农杆菌介导的叶盘转化法，进行白桦的遗传转化，并对获得的转基因白桦株系进行了耐盐性和抗旱性分析，结果显示，转基因株系在受到1.0％NaCl和15％PEG胁迫12h、24h后，这两种酶的活性均明显高于非转基因对照，表明白桦BpSPL9基因能够正向调控植物体内的SOD活性和POD活性，从而增强植物的抗逆境胁迫能力，测定的H₂O₂含量中，胁迫处理12h、24h后测定的转基因株系中H₂O₂含量比非转基因株系H₂O₂含量减少，说明白桦BpSPL9基因能够提高白桦的抗盐、耐旱能力。

附图说明

图1为BpSPL9基因PCR扩增产物电泳图谱；

图2为BpSPL9基因TOPO反应后菌液PCR检测电泳图谱；

图3为BpSPL9基因LR反应后菌液PCR检测电泳图谱；

图4为BpSPL9基因电击转化农杆菌后菌液PCR检测电泳图谱；