[发明专利]一种从镰形棘豆中具有抗炎活性总黄酮的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及天然药物领域，具体涉及镰形棘豆中具有抗炎活性总黄酮的提取方法。

背景技术

黄酮类化合物是两个苯环通过中央三碳相互联接而成的一系列化合物。母体结构包括包括黄酮类、二氢黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮醇类以及查尔酮类等。

藏药镰形棘豆(Oxytropis falcate Bunge)(藏药名为莪达夏)是豆科(Leguminosae)棘豆属(Oxytropis D.C.)多年生草本植物。生长在2700～4300m的河滩、沙地、山坡、草甸，主要产于青藏高原。据《晶珠本草》记载，镰形棘豆具有愈合疮口、利便、防止骨刺产生、治病痛、除毒、止血之功效，并能清毒、治疗炭疽病、麻风病及流感、扁桃体炎。

临床研究证明，镰形棘豆对于预防、治疗流行性感冒及慢性气管炎有独特疗效。并且，药理实验证明镰形棘豆总黄酮苷元是治疗慢性气管炎的有效部分，并能增加肾上腺皮质功能，说明黄酮类化合物是镰形棘豆的重要活性成分。

因此，如何有效提取出镰形棘豆中的总黄酮，具有重要的意义。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种镰形棘豆中总黄酮的提取方法，包括以下步骤：

取镰形棘豆，加入浓度为70％-80％醇类溶剂，微波提取，所述醇类溶剂与药材的体积质量比为10～35:1mL/g。

进一步地，所述醇类溶剂为甲醇或乙醇。

进一步地，所述醇类溶剂的浓度为75％。

进一步地，所述微波提取的功率为200W～900W。

进一步地，所述微波提取的功率为600W～900W，优选700W。

进一步地，所述微波提取的时间为10分钟～40分钟。

进一步地，所述微波提取的时间为20分钟～40分钟，优选30分钟。

进一步地，所述醇类溶剂与药材的体积质量比为20-35:1mL/g，优选25:1mL/g。

进一步地，所述微波提取温度为80～95℃，优选85℃。

本发明还提供了一种镰形棘豆中总黄酮提取物，所述提取物是按照下述方法制备得到的：

(1)取镰形棘豆，按照前述的提取方法制备得到镰形棘豆中总黄酮提取液；

(2)浓缩提取液，陶瓷膜滤过，有机膜纯化，取滤液，干燥即得。

本发明还提供了前述镰形棘豆总黄酮提取物在制备抗炎药物中的应用。

本发明镰形棘豆中具有抗炎活性总黄酮的提取方法，简便快速，可以有效提取出镰形棘豆中的总黄酮。同时，本发明得到的镰形棘豆提取物对LPS诱导的炎症模型具有显著的改善作用，主要通过抑制炎症因子NO、TNF-α等释放，直接发挥抑制作用，从而表现出抗炎作用。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

具体实施方式

镰形棘豆于2015年8月采自青海省海北州，经中国科学院西北高原生物研究所孙菁副研究员鉴定；芦丁标准品购自中国药品检定所(批号：100080-200707，含量为90.5％，)，乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠均为分析纯。自制超纯水。

微波提取仪(RWBC，南京苏恩瑞公司)METTLER TOLEDO PL203和XS204电子天平(瑞士梅特勒-托利多公司)；TU-1901型紫外可见分光光度计；

料液比的单位为ml/g。

总黄酮测定方法如下：

(1)对照品溶液的制备

取芦丁对照品20mg，精密称定，置50ml量瓶中，加75％乙醇使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取25ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml中含芦丁0.2mg)。

(2)标准曲线绘制

精密量取对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml，分别置25ml量瓶中，各加30％乙醇至6ml，加5％亚硝酸钠溶液1ml，混匀，放置6分钟，再加10％硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加30％乙醇至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应试剂为空白，照紫外-可见分光光度法(中国药典2015年版四部)，在500nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，对照品溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。

(3)样品溶液的制备