[发明专利]一种鸡新城疫HI抗体的快速测定法在审
| 申请号: | 201710153851.3 | 申请日: | 2017-03-15 |
| 公开(公告)号: | CN107064500A | 公开(公告)日: | 2017-08-18 |
| 发明(设计)人: | 党晓鹏 | 申请(专利权)人: | 陕西金冠牧业有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569 |
| 代理公司: | 北京华仲龙腾专利代理事务所(普通合伙)11548 | 代理人: | 李静 |
| 地址: | 710000 陕西省西安*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 新城 hi 抗体 快速 测定法 | ||
技术领域
本发明涉及动物疫病监测领域,具体是一种鸡新城疫HI抗体的快速测定法。
背景技术
新城疫病毒能够与动物的红细胞发生凝集,此即为红细胞凝集现象(HA)。这种红细胞凝集现象可被病毒悬液中加入的特异性免疫血清抗体所抑制,即为红细胞凝集抑制试验(HI)。新城疫病毒凝集红细胞的作用,能被特异性抗体抑制,因此,可用HI试验(简称血凝抑制试验)测定鸡血清中的HI抗体效价(滴度)。血清进行红细胞凝集抑制实验,如抗体效价有4倍以上升高,即有诊断意义。
鸡的免疫临界水平为3log2(成年)或4log2(雏鸡),但随地区不同而有差异。鸡血清的HI抗体效价高于4log2时可适当推迟新城疫免疫的时间,HI抗体效价在4log2以下,须马上进行新城疫疫苗接种,在新城疫流行的地区或鸡场,鸡的免疫临界水平,应再提高。鸡群的HI抗体水平是以抽检样品的HI抗体效价(1og2)的平均值表示的:如果某鸡群的10份样品中,HI抗体效价为8的有3份样品,为7的有5份样品,为6的有2份样品,它们的平均值为:平均水平在4(log2),说明该鸡群为免疫鸡群。若在检样中HI抗体效价的最高值与最低值相差太大时,则不能用上法计算平均水平,应根据临界水平以下的样品数在全部样品中所占的百分比决定免疫与否。
大型养鸡场,每次进行抽测时,抽样率一般不低于0.1%-0.5%,小型鸡群,抽样率应有所增加,一般认为理想的抽样率应为2%。鸡群接种新城疫疫苗后,经2-3周测血清中的HI抗体效价,若提高2个滴度以上,表示鸡的免疫应答良好,疫苗接种成功;若HI抗体效价无明显提高,表示免疫失败。目前鸡场普遍采用96孔微量反应板进行鸡新城疫HI抗体的测定,这种方法需分离血清并且将血清倍比稀释,配制浓度为0.9%的红细胞悬浮液,且操作程序复杂,这就为饲养者带来了不便。
发明内容
本发明的目的在于提供一种鸡新城疫HI抗体的快速测定法,以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
一种鸡新城疫HI抗体的快速测定法,具体步骤如下:
步骤一,向容器中加入含有4单位抗原的溶液0.8-1.5ml,抗原溶液中含有质量分数为0.1-0.3%的柠檬酸钠;
步骤二,向抗原溶液中加入被检测鸡的静脉全血一滴;
步骤三,将加入静脉全血后的容器摇晃均匀并且静置10-20分钟,观察结果即可。
作为本发明进一步的方案:容器采用试管或者反应瓷盘。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:本发明操作步骤简单,无需进行血清分离和红细胞悬浮液配置,只需事先配置好含有4单位抗原的溶液,向其中注入一滴被检测鸡的静脉血液并且摇匀静置,即可观察结果,测定时间短,方便饲养者使用。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明。
一种鸡新城疫HI抗体的快速测定法,具体步骤如下:
步骤一,向试管或者反应瓷盘中加入含有4单位抗原的溶液0.8-1.5ml,抗原溶液中含有质量分数为0.1-0.3%的柠檬酸钠;
步骤二,向抗原溶液中加入被检测鸡的静脉全血一滴;
步骤三,将加入静脉全血后的容器摇晃均匀并且静置10-20分钟,观察结果即可。
测定结果的判断标准为:阳性,HI抗体效价5log2以上;可疑,HI抗体效价4log2左右;阴性,HI抗体效价3log2以下。一滴血约0.03ml,其中血清含量0.02ml,红细胞0.009ml。
对于本领域技术人员而言,显然本发明不限于上述示范性实施例的细节,而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下,能够以其他的具体形式实现本发明。因此,无论从哪一点来看,均应将实施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定,因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外,应当理解,虽然本说明书按照实施方式加以描述,但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案,说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见,本领域技术人员应当将说明书作为一个整体,各实施例中的技术方案也可以经适当组合,形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
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