[发明专利]一种东海乌参胶原蛋白低聚肽的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种胶原蛋白肽的制备，尤其涉及一种东海乌参胶原蛋白低聚肽的制备方法。

背景技术

胶原多肽是胶原或明胶经蛋白酶等降解处理后制得的介于蛋白质和氨基酸之间的产物，一般将由2到10个氨基酸通过肽键形成的直链肽称为寡肽或小肽；由肽键结合起来的多于10个氨基酸的聚合体则称为多肽。近年来，很多学者对肽的消化吸收机制进行了研究，认为肽甚至相当量的蛋白质在动物体内可以被完整吸收并被机体利用，如口服疫苗和酶法治疗疾病。肽的转运系统和游离氨基酸相比转运速度更快。许多试验表明，肽的添加还可以提高氨基酸的吸收速度。此外肽还能促进蛋白质沉积率，因为肽能直接用于人体蛋白质的合成。长期食用经过添加胶原蛋白肽的食品有助于改善皮肤弹性，延缓衰老，增强免疫力，同时食用方便，适合于大众人群。

海参是重要的海洋食物和药物资源。全世界有1000多种海参，其中40多种可供食用。近年来，我国海参养殖业发展极快，海参年产量已超过6万吨。因此，亟待进一步开发海参的高值化加工技术。海参体壁含有结构独特的活性物质如海参胶原蛋白、海参多糖、海参皂苷等。药理实验证明，海参具有抗肿瘤、提高免疫功能、降血脂、抗凝血、抗动脉粥样硬化等多种生理活性。目前，国内外对海参活性成分的研究和开发主要集中在海参多糖和海参皂苷等方面。

海参胶原蛋白含量占海参体壁粗蛋白的60％以上，有关海参胶原蛋白类型和理化性质的研究已有报道(Comp Biochem Physiol，1995，112A：463-478；Food Chemistry andToxicology，2002，67(4)：1319-132；水产学报，2006，4：549-553)，中国发明专利CN 101215315A也公开了一种在低温下(0-25℃)利用胃蛋白酶促溶提取海参胶原蛋白的方法。与胶原蛋白相比，胶原蛋白肽具有更易吸收和高生理活性等特点。有关海参多肽的研究已有报道，目前已公开的发明专利有CN 1858222A和CN 101191139A。这些研究中所述的海参多肽是一种至少包括海参皂苷、蛋白多肽和胶原多肽等活性物质的混合物。有关海参胶原蛋白活性肽尚未见报道。

发明内容

本发明提供了一种提高纯度与提取率，去除苦腥味、提高口感、利于人体吸收的东海乌参胶原蛋白低聚肽的制备方法。

本发明通过以下技术方案：

一种东海乌参胶原蛋白低聚肽的制备方法，包括如下工艺步骤：

a.选取新鲜东海乌参为原料，4℃清水浸泡50-60min，捞出去除内脏后切成小块，用浸泡液浸泡搅拌5天，捞出后使用打浆机进行打浆处理，加入35-40倍体积的纯净水后采用胶体磨进行研磨细化处理，得浆状物；

b.将步骤a得到的浆状物加入乙酸进行提取2-3天，离心合并上清液，加入添加剂静置20-30min后15000r/min离心5min得到沉淀物，经盐析、透析后冻干得到东海乌参胶原蛋白；

c.在步骤b得到的东海乌参胶原蛋白中，加入东海乌参胶原蛋白重量0.1-2％的胃蛋白酶，打开电脑微波-超声波组合催化合成仪对酶解物进行超声波-微波辅助酶解，其中超声波的探头插入深度固定不变，微波功率800W、超声功率250W、超声-微波处理温度为41℃条件下处理15分钟后，继续酶解2h，加入东海乌参胶原蛋白重量0.2-0.5％的胰蛋白酶与1-3％的木瓜蛋白酶酶解30min，最后加入东海乌参胶原蛋白重量0.3-0.5％的丝氨酸蛋白酶继续酶解45min，升温至120℃灭酶30min，得到酶解液；

d步骤c得到的酶解液在-20℃预冻1h，然后在-70℃冷阱温度和＜150Pa真空度的条件下冷冻干燥8-10h，直接得到东海乌参胶原蛋白低聚肽；或者，步骤c得到的酶解液采用孔径为0.1-0.5μm的管式膜脱除大分子，然后采用截留分子量为3kDa的超滤膜截留分级，截留液采用纳滤膜浓缩脱盐，然后在175-185℃进风温度、75-85℃出风温度和0.35-0.45MPa喷雾压力的条件下喷雾干燥，得到东海乌参胶原蛋白低聚肽。在本技术方案中，步骤a中用浸泡液浸泡是为了去除钙、铁、锰、镁、铝、铅等污染元素。

作为优选，步骤a中浸泡液为0.2M EDTA，pH8.0。

作为优选，步骤b中乙酸的含量为0.5M乙酸，其中含质量分数为0.1％胃蛋白酶。

作为优选，步骤b中添加剂由以下重量份的原料组成：食盐5-7份、果糖6-10份、盐酸硫胺素6-8份、谷氨酰胺10-15份与丝氨酸12-15份，添加剂的加入量为上清液质量的10-15％。