[发明专利]一种岭南药食同源植物三叉苦的快速繁殖方法

说明书

本发明涉及涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种岭南药食同源植物三叉苦的快速繁殖方法，包括依次进行的如下步骤：获取三叉苦植株的外植体、不定芽诱导、不定芽的增殖培养、不定芽的生根培养、试管苗移栽；所述的不定芽诱导的不定芽诱导培养基包括：Nitsch培养基、1.0～3.0mg/L 6‑BA、0.5～1.0mg/L NAA、0.01～0.05mg/L TDZ、25～30g/L蔗糖、3.5～6.0g/L琼脂、0.1～0.3g/L活性炭，pH为5.4～5.8，本发明的方法的三叉苦试管苗移栽成活率达到95％以上。

技术领域

本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种岭南药食同源植物三叉苦的快速繁殖方法。

背景技术

三叉苦(Melicope pteleifolia(Champion ex Bentham)Hartley)，又名三桠苦、三丫苦、三叉虎、斑鸠花、三支枪、三脚鳖等，为芸香科蜜茱萸属药用植物，最早记载于《岭南采药录》，是岭南地区常用的中草药，常用来治疗跌打损伤、脓疮、湿疹等疾病。三叉苦具有清热解毒、祛风除湿、消肿止痛等功效，常用于咽喉肿痛、疟疾、黄疸型肝炎、风湿骨痛、湿疹、皮炎、疮疡等疾病的治疗，目前己被广泛应用于中成药品中，如三九感冒灵颗粒、三九胃泰、三金片等。同时，三叉苦又是一种常用的药食同源植物，具有较高的食用价值，作为广东凉茶的重要原料约有100余年的历史。三叉苦作为一种应用比较广泛的民族药，具有一定的临床应用基础，有着广泛的应用前景和开发利用价值。

三叉苦在我国主要分布于广东、广西、海南、福建、台湾、贵州和云南等省区，四川和重庆等地区有少量分布，常见于丘陵、平原、溪边和林缘的灌木丛。目前，三叉苦基本上处于野生状态，野生三叉苦质量较好，价格不断上扬，致其野生资源被过度采割，为了防止三叉苦资源的匮乏和满足未来对其开发利用的需要，人工大面积栽培势在必行。三叉苦主要采用种子和扦插繁殖，但由于三叉苦种子硬实，发芽率低，而扦插繁殖存在周期长、繁殖系数低等缺点，建立三叉苦的组培快繁技术已成为大面积规模化种植首要解决的技术。因此，本发明选择野生三叉苦新生营养芽为外植体，经诱导、增殖、生根以及移栽等步骤，实现了三叉苦的快速繁殖。本发明具工艺简便、易操作、繁殖系数高、成苗快等特点，可直接用于三叉苦的产业化繁育，对于三叉苦的遗传改良、种质资源保护、促进资源的可待续利用具有重要意义。

目前，国内外尚未有三叉苦组织培养技术的报道，也未有三叉苦组培快繁专利的申请。

发明内容

本发明的目的是提供一种岭南药食同源植物三叉苦的快速繁殖方法，本发明选择野生三叉苦新生营养芽为外植体，经诱导、增殖、生根以及移栽等步骤，实现了三叉苦的快速繁殖，从而实现了本发明的目的。

本发明提供的技术方案为：一种岭南药食同源植物三叉苦的快速繁殖方法，其特征在于：包括依次进行的如下步骤：获取三叉苦植株的外植体、不定芽诱导、不定芽的增殖培养、不定芽的生根培养、试管苗移栽；

所述的不定芽诱导的不定芽诱导培养基包括：Nitsch培养基、1.0～3.0mg/L 6-BA、0.5～1.0mg/L NAA、0.01～0.05mg/L TDZ、25～30g/L蔗糖、3.5～6.0g/L琼脂、0.1～0.3g/L活性炭，pH为5.4～5.8。

在上述的岭南药食同源植物三叉苦的快速繁殖方法中，所述的不定芽诱导的方法为：将三叉苦的外植体清洗消毒后剪切成1.0～1.5cm左右的带节茎段并接种到不定芽诱导培养基中在25～28℃进行全暗培养45～60天即可诱导形成不定芽。

在上述的岭南药食同源植物三叉苦的快速繁殖方法中，不定芽的增殖培养所用的不定芽增殖培养基包括：Nitsch培养基、1.0～1.5mg/L 6-BA、0.5～1.0mg/L NAA、15～30g/L蔗糖、3.5～6.0g/L琼脂、0.2～0.5g/L活性炭，pH为5.4～5.8。