[发明专利]一种检测茶叶中GABA含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于食品检测技术领域，涉及一种对茶叶中GABA含量检测一种方法。

背景技术

γ-氨基丁酸(简称GABA)是一种天然存在的非蛋白质氨基酸，是中枢神经系统中很重要的抑制性神经递质，具有极其重要的生理功能，它能促进脑的活化性，健脑益智，抗癫痫，促进睡眠，美容润肤，延缓脑衰老机能，能补充人体抑制性神经递质，具有良好的降血压功效。促进肾机能改善和保护作用。抑制脂肪肝及肥胖症，活化肝功能。每日补充微量的γ-氨基丁酸有利于心脑血压的缓解，又能促进人体内氨基酸代谢的平衡，调节免疫功能。

γ-氨基丁酸(GABA)是一种天然活性成分，广泛分布于动植物体内。茶叶具有GABA合成的生物合成基础，是GABA的天然来源，同时，茶叶也是一种天然的健康的植物饮料，其具有生津止渴、清心明目、利尿清热、清除疲劳等功效，长期饮用能够预防心脑血管疾病、抗癌、减肥等。

因此建立通过提取获得γ-氨基丁酸的方法，使用LC-MS-MS分析方法对茶叶中γ-氨基丁酸的含量进行定量，对茶叶价值的开发具有很好的应用效果。

现有的茶叶中GABA的检测方法有：放射性免疫法[RIA],纸上电泳法，酶联荧光法[ELISA]，纸层析法，氨基酸分析仪法，薄层扫描法，高效液相色谱法，气相色谱法。其中的高效液相色谱法因其灵敏度高、精密度好，准确性高而被广泛应用。由于GABA是一种有机酸，极性强，因而一般要经过衍生，有柱前衍生和柱后衍生，多用柱前衍生，该方法较繁琐费时。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的缺陷和不足，提供一种高效、快速、准确测定茶叶中GABA含量的检测方法，为茶叶的价值利用提供了保障。

本发明的技术方案：

一种检测茶叶中GABA含量的方法，该方法采用液质联用，对GABA进行定量检测。

一种检测茶叶中GABA含量的方法，依次包括以下步骤：样品处理，UPLC-MS/MS分析，外标法定量。

所述样品处理方法为：

茶叶的提取：称取一定量的茶叶，以1:10的比例加入水浸泡，并于超声仪中超声1-4h后取上清，经滤膜过滤后进样即可。

更优选的，茶叶的提取：称取2-4g的茶叶，以1:10的比例加入20-40mL水浸泡，并于超声仪中超声2h后取上清，经滤膜过滤后进样即可。

标线的样品处理：精密称取1.84mg的GABA标准品，加水溶解配制成2mg/mL的母液，接着用水逐级稀释为500、200、100、50、20ng/mL的系列溶液后进样分析即可。

所述UPLC-MS/MS分析：将处理后的样品使用三重四级杆液质联用仪，在以下条件下进行分析：

液相方法

液相色谱柱：ACQUITY UPLC BEH HILIC,2.1*100mm,1.7μm柱温：35℃

流动相：A：水(含0.1％甲酸，v/v)，B：乙腈；流速：0.3mL/min；柱温：35℃；进样量：10μL；

梯度洗脱，洗脱条件见表1。

表1液相梯度