[发明专利]一种制备基于蛋白A突变体的结合蛋白的方法

权利要求书

1.一种制备基于蛋白A突变体的结合蛋白的方法，包括下列步骤：

a)提供单体经过修饰的蛋白A的异源多聚体突变体的库，所述库包括异源多聚体蛋白质，所述异源多聚体蛋白质包括两个或更多以首尾排列的方式连接在一起的蛋白A单体，其中所述异源多聚体蛋白质的至少两个所述单体是通过对位于SEQ ID No：1中的9、10、11、13、14、17、18、24、25、27、28、32、35处的至少五个氨基酸的替换而进行的修饰，所述修饰的单体蛋白质与未修饰的蛋白A具有至少80％的氨基酸序列一致性；

b)为所述经过修饰的蛋白A的库提供潜在的靶分子；

c)使所述修饰的蛋白质的库与所述靶分子接触；

d)通过筛选方法得到异源多聚体蛋白A突变体，所述突变体以K_D范围是10^-7-10^-12M的亲和力结合于所述靶分子。

2.权利要求1步骤所述的方法，其中所述至少五个氨基酸的替换优选为8-11个氨基酸替换。

3.根据权利要求1所述的方法，进一步包括所述的异源多聚体蛋白A突变体库的核苷酸库。

4.权利要求1的蛋白质突变体库与权利要求3的核苷酸库的组合，所述蛋白质突变体库的每个成员与编码该成员的核苷酸通过用于基因型-表型偶联的手段以物理方式结合。

5.权利要求4的组合，其中所述用于基因型-表型偶联的手段包括噬菌体展示系统、酵母菌展示、细菌展示、细胞表面展示或核糖体展示系统。

6.权利要求1-5中的任一项所述的方法，其中所述靶分子是抗原或半抗原。

7.一种通过权利要求3所述的核苷酸库的表达获得的蛋白质库。

8.一种包含根据权利要求3所述的核苷酸库的原核或真核的细胞或噬菌体库。