[发明专利]黑酵母菌、生产β-葡聚糖的培养基与方法、以及含有β-葡聚糖的黑酵母菌培养物与组合物

说明书

本申请提供一种黑酵母菌(Aureobasidium pullulans)及一种用于生产β‑葡聚糖的培养基，其可包含：碳源、氮源及抗坏血酸。还提供一种生产β‑葡聚糖的方法，包括将所述的黑酵母菌培养于发酵培养基中进行发酵。由于所述黑酵母菌具有不产生黑色素的优势，因此，通过改良培养基的组成和培养方法，可以有效地提高β‑葡聚糖的产量并减少工艺废液的排放。

技术领域

本发明涉及一种生产β-葡聚糖的方法，特别是关于一种通过不产生黑色素的黑酵母菌以及发酵培养基，从而达到高产量生产β-葡聚糖的方法。

背景技术

黑酵母菌(Aureobasidium pullulans)，又名暗金黄担子菌或出芽短梗霉，是一种类似于酵母的真菌。黑酵母菌细胞壁的周边会产生多糖类物质，例如β-葡聚糖(β-glucan)。

β-葡聚糖已是中国台湾食品药物管理署及日本厚生劳动省所公告可供食品使用的原料之一，也是美国FDA公告的一般公认为安全的(GRAS，Generally Recognized AsSafe)食品添加剂，在开发上相对没有食品安全的顾虑。

自例如大麦、燕麦、酵母菌和菇蕈类的原料萃取β-葡聚糖等有效成份时，必须经过使用多种化学药品的处理程序。在这些处理程序中，许多有益的微量成份可能丧失，而使产品不能获得预期的效果。通过植物产生的β-葡聚糖，则会根据其为野生的或养殖的，或者根据植物生长的条件、环境不同，而影响β-葡聚糖的含量。相较于例如大麦、燕麦、酵母菌和菇蕈类原料的工艺，通过黑酵母菌生产β-葡聚糖时，由于β-葡聚糖会分泌至胞外，可以省去萃取工艺并减少废液的产生。此外，通过黑酵母菌生产β-葡聚糖也不会有前述通过植物生产β-葡聚糖的缺点。

然而，虽然利用黑酵母菌生产β-葡聚糖有上述优点，但通过黑酵母菌发酵生产β-葡聚糖，仍因下列原因而受到限制：

(1)产量低：黑酵母菌的发酵过程中会产生可溶性胞外多醣，但随着多醣产量的增加，容易使整体发酵液形成黏稠的凝胶状，此高黏稠度的特性容易造成如通气、溶氧、搅拌等质传或热传等问题，进而影响β-葡聚糖的产量。

(2)多醣含有的黑色素难以去除：一般黑酵母菌株发酵产生的胞外多醣含有黑色素，因此产物的卖相较差。倘若要进一步将该黑色素去除，又会增加工艺上的不便，进而影响后续将其产品化的生产工艺。

发明内容

鉴于上述现有技术的问题，本发明的目的就是提供一种黑酵母菌，其具有较高的β-葡聚糖产量，并且所产生的β-葡聚糖几乎不含黑色素。

根据本发明的一个目的，提供一种黑酵母菌(Aureobasidium pullulans)，其于2016年10月19日保藏于日本独立行政法人制品评价技术基础机构专利微生物保藏中心(Patent Microorganisms Depositary,National Institute of Technology andEvaluation)，保藏编号为NITE BP-02372。

根据本发明的另一个目的，提供一种用于生产β-葡聚糖的培养基，可包含：碳源、氮源及抗坏血酸；其中碳源可选自：乳糖、果糖、麦芽糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、木糖醇、菊糖、山梨糖醇、海藻糖、蔗糖、糖蜜及其组合；以及氮源可选自：蛋白胨(peptone)、酵母提取物(yeast extract)、尿素、硝酸钾、硝酸钠、硫酸铵、卵磷脂(lecithin)及其组合。

优选地，碳源可为蔗糖或葡萄糖。

优选地，基于所述发酵培养基的总体积，蔗糖的浓度可以为10～70g/L。优选地，基于所述发酵培养基的总体积，葡萄糖的浓度可为25～150g/L。

优选地，氮源可为卵磷脂。优选地，基于所述发酵培养基的总体积，卵磷脂的浓度可为小于或等于6g/L。优选地，基于所述发酵培养基的总体积，抗坏血酸的浓度可为小于或等于6g/L。