[发明专利]miR‑491在制备用于治疗骨肉瘤的药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及医药和生物技术领域，具体涉及一种microRNA在制备用于治疗骨肉瘤的药物中的应用。

背景技术

骨肉瘤(Osteosarcoma)是起源于骨骼的恶性肿瘤，是骨恶性肿瘤中最多见的一种，其发病率在原发性骨恶性肿瘤中占首位，致残率、致死率高、主要发生在10-25岁年龄段。骨肉瘤患者中75％为青少年男性患者，预后极差，患者术后5年存活率为60％-70％，近些年并未得到进一步提升。治疗失败的主要原因是转移、复发和耐药。据文献报告有30％骨肉瘤患者对化疗产生耐药现象，并有80％的骨肉瘤患者因发生转移而死亡。据报告，骨肉瘤患者一旦发生转移其生存率仅为20-30％。肺转移是骨肉瘤转移的主要方式。在初诊患者中有20％的患者出现远处转移，其中90％为肺转移；接受正规治疗的患者中有50％的患者出现复发，其中80％为肺转移型复发，解决骨肉瘤肺转移和克服耐药可以进一步提高骨肉瘤患者的5年生存率。但目前还没有方法可以有效的治疗骨肉瘤的肺转移和耐药现象。

已有大量实体瘤相关研究显示，肿瘤原发灶与转移灶之间在组织特点、基因组表达、细胞生物学行为等多个方面存在较多区别。利用免疫组化和基因测序技术对骨肉瘤患者原发病灶组织与转移灶组织进行检测对比，分析发现，患者原发病灶与骨转移病灶之间的生物学信息以及基因表达具有相似性。但部分转移灶，特别是肺转移灶在组织学和基因表达上与原发病灶具有较大差异。因此在治疗时，极有可能出现对原发病灶有效，而转移病灶无效的情况，反之亦然。在JAFFE等的研究中以阿霉素、顺铂、甲氨蝶呤、异环磷酰胺(ADM,DDP,MTX,IFO)为主大剂量化疗对骨肉瘤原发疾病取得了74％的5年生存率，但在转移或复发患者中明显疗效更低。这也从侧面证明了对原发灶与转移灶的治疗需要进一步的区分、细化，才能获得最佳效果。

近来，人们越来越认识到miRNA是在发育、病理与生理条件下发挥重要作用的调控因子，参与肿瘤的发生、病毒的感染、细胞的分化与功能的发挥等一系列的生命过程中。miRNA是指由19-22个核苷酸组成的、非编码蛋白的RNA。这些小RNA分子非编码蛋白，通过降低mRNA的水平或与mRNA 3’UTR相结合抑制翻译，从而降低体内的蛋白水平。非编码RNA分子占人类基因组总量的98％，非编码RNA与蛋白编码RNA的比例与发育的复杂性密切相关。通过对目标基因信使RNA的降解和翻译抑制对细胞生长、发育、分化、死亡等生物过程起着重要的作用。研究表明，人类基因中有1/3的基因直接收到miRNA的调控。最近研究表明包括骨肉瘤在内的大部分肿瘤中存在miRNA的异常表达，而且异常表达的miRNA与肿瘤的发生、发展和患者的预后密切相关。更重要的是靶向此类异常表达的miRNA可以有效的抑制骨肉瘤的转移和复发。

miR-491是一种已知道的miRNA，其相关基本信息为：Accession No:MIMAT0002807，基本序列为5`-GGAGUACCUUCCCAAGGGGUGA-3`。已有研究报告表明miR-491在前列腺癌、肺癌、直肠癌、胃癌和乳腺癌中异常表达，且起抑癌的作用。然而，其对骨肉瘤的肺转移的影响还未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抑制骨肉瘤肺转移的含有miR-491的药物组合物，为临床上治疗肺转移性骨肉瘤提供可能。

本发明的一个方面提供了miR-491在制备治疗骨肉瘤的药物中的应用，所述miR-491的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,为5`-GGAGUACCUUCCCAAGGGGUGA-3`。

其中，miR-491序列包括经取代和/或缺失和/或添加一个或几个核苷酸，没有或经过化学修饰的特定序列的单链寡核苷酸分子、miR-491的前体或表达特定序列单链核苷酸分子的重组质粒，具有miR-491生物活性的衍生RNA。

在一些优选的实施方案中，所述应用包括制备用于抑制骨肉瘤细胞生长、肺转移和肺转移性复发药物。

在一些实施方案中，包括将miR-491与药学上可接受的载体结合后，与抗肿瘤药物和/或药物可接受的辅料复配制成药物组合物。

本发明的另一个方面提供了一种药物组合物，所述药物组合物以miR-491为活性成分，其中，所述miR-491的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,为5`-GGAGUACCUUCCCAAGGGGUGA-3`。

在一些实施方案中，所述药物组合物含有与载体结合的miR-491和/或药物可接受的辅料。

在一些实施方案中，所述药物组合物中含有铂类抗肿瘤药物。