[发明专利]一种超高效液相色谱‑串联质谱检测三乙膦酸铝的方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，涉及一种有机污染物的定量分析方法，具体地说，是一种利用超高效液相色谱-串联质谱同时测定乙基磷酸和亚磷酸离子的含量，通过计算其比例并折算成为三乙膦酸铝含量的定量方法。

背景技术

三乙膦酸铝(fosetyl-aluminium)是一种有机磷类高效、广谱、内吸性低毒杀菌剂。它在植物体内可以上、下双向传导，对单轴霉菌属、霜霉属、疫霉属引起的病害有良好的防治效果，是目前国内外防治水稻稻瘟病、果树、蔬菜霜霉病、疫病应用较多的药剂。

三乙膦酸铝由乙基磷酸离子和铝离子以化学键的形式构成，其在基质中通常解离后以化学离子乙基磷酸和亚磷酸离子的形式存在。传统的分析方法以络合滴定测定三乙膦酸铝含量[化工技术与开发,2007,36(1):39-41,35]，但是该方法操作复杂，在做痕量分析时，误差较大。近年来，随着色谱技术的普及，各类基于色谱分离后的分析技术也被应用于三乙膦酸铝的测定当中。常规方法使用三甲基硅重氮甲烷在恒温下进行衍生化[农药,2009,48(10):747-748,759]，或将三乙膦酸铝在密闭的反应瓶中完全碱解后生成乙醇[色谱,1993,11(5):285-287]，通过气相色谱法测定衍生化或碱解后的产物对三乙膦酸铝进行定量，但是这些方法前处理较复杂，实验条件较难掌控。考虑到三乙膦酸铝以离子的形式存在，有文献报道使用离子色谱分析样品离子的含量[Microchemical Journal,1995,52(1):68-76]，并使用乙基膦酸离子的含量进行定量，但是该方法容易受到复杂基质的干扰，影响测定结果。此外，液相色谱技术也被应用于三乙膦酸铝的定量分析当中，有文献报道使用离子对反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定三乙膦酸铝的含量[色谱,2009,27(6):849-851]，但是该方法的检出限较高，不能满足三乙膦酸铝残留分析的需求。

我国的食品安全国家标准《食品中农药最大残留限量》(GB 2763-2014)中规定三乙膦酸铝的残留定义为乙基磷酸和亚磷酸及其盐之和，以乙基磷酸表示。现有的文献中仅测定乙基磷酸的含量[Journal of AOAC International,2003,86(4):832-838]，不能满足国家标准中关于三乙膦酸铝残留定义的需求。

发明内容

本发明的目的是提供一种超高效液相色谱-串联质谱检测三乙膦酸铝的方法，采用超高效液相色谱-串联质谱法检测乙基磷酸和亚磷酸离子的含量，同时通过计算其比例并折算成为三乙膦酸铝含量，用于三乙膦酸铝残留量的准确、快速分析。

本发明所采用的技术原理：

低毒杀菌剂--三乙膦酸铝在溶液中以乙基磷酸和亚磷酸两种形式存在，对两种酸进行离子化裂解，然后利用超高效液相色谱-串联质谱测定乙基磷酸和亚磷酸两种离子的含量。根据不同溶液中两种离子的存在比例基本为40：60的规律，将测定的离子含量经计算、折算即可得到待测物中三乙膦酸铝的含量。

本发明所采用的技术方案：

一种超高效液相色谱-串联质谱检测三乙膦酸铝的方法，其步骤如下：

1、准确称取样品后加入乙腈进行预处理，然后以乙腈为标准按质量体积比为1：10～15(g/mL)的比例加入氯化钠，剧烈震荡1～3min后，以4000r/min的转速离心4～6min，取上层乙腈溶液；在乙腈溶液中按体积质量比为1：0.02～0.025(mL/g)的比例分别加入无水硫酸镁和PSA吸附剂，剧烈震荡1～3min后，以4000r/min的转速离心5～7min，取上清液作为提取液，待测。所述样品是果蔬样品、土壤样品或水样品。所述预处理过程是：在果蔬样品中按质量体积比为1：2～3(g/mL)的比例加入乙腈，然后高速匀浆2～5min；在土壤样品中按质量体积比为1：2～3(g/mL)的比例加入乙腈，然后振荡13～18min；在水样品中按体积比为1：2～3(mL/mL)的比例加入乙腈，然后振荡13～18min。

2、使用超高效液相色谱—串联质谱测定提取液中乙基磷酸离子和亚磷酸离子的含量，其中乙基磷酸的母离子和定量离子对分别为109和81/63，亚磷酸的母离子和定量离子对分别为81和79/63。