[发明专利]PRIMA1基因在制备椎间盘退行性疾病诊断试剂中的应用

说明书

本发明公开了PRIMA1基因或其表达产物在制备椎间盘退行性疾病诊断试剂中的应用。本发明还公开了一种检测椎间盘退行性疾病的试剂盒，所述试剂盒包括特异性扩增PRIMA1基因的引物组以及特异性捕获PRIMA1基因的荧光探针。本发明还公开了一种治疗椎间盘退行性疾病的药物组合物，所述药物组合物包含PRIMA1基因或其表达产物的激活剂。本发明发现了一种椎间盘退行性疾病的诊断分子标记物PRIMA1基因，并证实PRIMA1表达水平在椎间盘退行性疾病组织中表达下调。利用PRIMA1检测椎间盘退行性疾病不仅能够快速有效的做到早期诊断，其精确度大大提高，而且为基因治疗、药物治疗等临床应用提供了治疗靶点和重要依据。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及PRIMA1基因在制备椎间盘退行性疾病诊断试剂中的应用。

背景技术

椎间盘退行性疾病是指椎间盘组织在多种原因综合作用下发生细胞介导的生物化学变化，引起老化加速、椎间盘力学特性改变，使临近骨关节、韧带发生相应变化，造成脊柱不稳，压迫脊髓、神经根、动脉，引起相应临床症状和体征的综合征。它包括椎间盘源性腰痛、椎间盘突出症、退行性脊椎不稳症、退行性椎管狭窄症、退行性滑脱症等，是临床上常见疾病之一。其病因尚不清楚，目前普遍认为椎间盘退行性疾病的发生是遗传和环境因素共同作用的结果。随着基因检测技术的发展，近年来，人们逐渐意识到遗传易感性即遗传因素对于揭示椎间盘退行性疾病发病的重要作用。

目前椎间盘退行性疾病一般采取保守治疗，即从保守治疗依次到微创、常规手术治疗、非融合固定治疗、融合固定治疗的阶梯。越是高级阶梯的治疗，创伤越大，对机体自然解剖状态的干预越大，每一高级阶梯的治疗可作为对相对低级阶梯治疗的补救措施。对患者采取的治疗方案要根据患者病情所处的阶段，同时也要考虑到患者个体因素，如创伤、风险、费用以及患者的意愿。但是无论哪种手术方式，均不能在椎间盘退变的早期进行有效地干预，不能延缓或逆转疾病的发展。开放手术(椎间盘切除融合内固定术)虽能较为彻底的切除退变椎间盘，但手术创伤大，费用高，内固定限制了脊柱的活动度，加速邻近节段椎间盘的退变。微创手术不能彻底切除退变椎间盘组织，术后症状可能不能完全缓解，术后复发的可能性较大。

发明内容

本发明的目的之一在于提供PRIMA1基因或其表达产物在制备椎间盘退行性疾病诊断试剂中的应用。

本发明的目的之二在于提供一种检测椎间盘退行性疾病的试剂盒。

本发明的目的之三在于提供一种治疗椎间盘退行性疾病的药物。

为实现上述目的，本发明首先提供PRIMA1基因或其表达产物在用于制备椎间盘退行性疾病诊断试剂中的应用。

优选地，所述PRIMA1基因或其表达产物在椎间盘退行性疾病组织中表达下调。

优选地，所述诊断试剂包括基因水平的诊断试剂和蛋白水平的诊断试剂，所述基因水平的诊断试剂包括通过实时荧光定量PCR方法或基因芯片方法检测基因表达水平；所述蛋白水平的诊断试剂包括通过免疫学方法检测PRIMA1基因表达产物的表达水平。

优选地，所述实时荧光定量PCR方法包括SYBRGreen法和TaqMan探针法。

优选地，所述基因芯片包括固相载体以及固定在所述固相载体上的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括特异性捕获PRIMA1基因的部分或全部核苷酸序列。

优选地，所述免疫学方法为ELISA检测方法。

优选地，所述ELISA法为使用ELISA检测试剂盒，所述试剂盒包括：包被PRIMA1基因单克隆抗体的固相载体，酶标抗体，酶的底物，产物标准品，阴性对照品，稀释液，洗涤液，酶反应终止液等。所述抗体可采用市售的PRIMA1基因单克隆抗体，也可以通过本领域技术人员公知的方法来获得。