[发明专利]一种水稻粒宽基因GW2的分子标记及其应用有效

专利信息
申请号: 201710139181.X 申请日: 2017-03-09
公开(公告)号: CN107058516B 公开(公告)日: 2021-01-26
发明(设计)人: 黄培劲;龙湍;李佳林;唐杰;刘昊;李新鹏;张维;安保光;曾翔;吴永忠 申请(专利权)人: 海南波莲水稻基因科技有限公司
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12N15/11
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王文君
地址: 570125 海南省海*** 国省代码: 海南;46
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摘要:
搜索关键词: 一种 水稻 基因 gw2 分子 标记 及其 应用
【权利要求书】:

1.用于检测水稻粒宽基因GW2的特异性引物组合,其特征在于,其由核苷酸序列如SEQID NO.1-3所示的引物组成。

2.权利要求1所述的特异性引物组合在鉴定水稻粒宽基因GW2基因型中的应用。

3.权利要求1所述的特异性引物组合在水稻种质资源改良中的应用,所述种质资源指水稻粒宽、粒重。

4.检测水稻粒宽基因GW2基因型的方法,其特征在于,对待测样本提取基因组DNA后,利用SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的正向引物、SEQ ID NO.3所示的反向引物进行PCR,对PCR扩增产物大小进行分析,根据PCR产物大小确定GW2的基因型;

若扩增产物只出现88 bp条带,则表明待测样品的GW2基因为野生型;若只出现81 bp条带,则表明待测样品的GW2基因为突变型;若同时出现88 bp和81 bp条带,则表明待测样品的GW2基因为杂合型。

5.一种检测水稻谷粒宽度的方法,其特征在于,对待测样本提取基因组DNA后,利用SEQID NO.1和SEQ ID NO.2所示的正向引物、SEQ ID NO.3所示的反向引物进行PCR,对PCR扩增产物大小进行分析,根据PCR产物大小推测水稻粒宽变化;

若扩增产物只出现88 bp 条带,则表明待测样品的基因型为GW2基因野生型,谷粒较窄;若只出现81 bp条带,则表明待测样品的基因型为GW2基因突变型,谷粒较宽;若同时出现88 bp和81 bp条带,则待测样品的的基因型为GW2基因杂合型,粒宽处于野生型和突变型之间。

6.如权利要求4或5所述的方法,其特征在于,PCR的反应体系为:Biomiga的2 × BenchTopTM Taq master mix 5 μL,10 μM 的两个正向、一个反向引物各0.5 μL,10% DMSO 0.5 μL,模板DNA 50-100 ng,补灭菌ddH2O至10 μL;

PCR反应条件为:94 ℃,4 min;94 ℃,30 s,60 ℃,30 s,72 ℃,20 s,共35个循环;72℃,5 min,16 ℃,1 min。

7.含有权利要求1所述的特异性引物组合的试剂盒。

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