[发明专利]一种生产L-草铵膦的方法有效
| 申请号： | 201710138579.1 | 申请日： | 2017-03-09 |
| 公开（公告）号： | CN106916857B | 公开（公告）日： | 2019-08-27 |
| 发明（设计）人： | 杨立荣;周海胜;蒙丽钧;尹新坚;徐刚;吴坚平 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12P13/04 | 分类号： | C12P13/04 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 蒋琼 |
| 地址： | 310013 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 生产 草铵膦 方法 | ||
1.一种生产L-草铵膦的方法，其特征在于，以2-羰基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸为底物，经酶催化体系催化获得L-草铵膦，其特征在于，所述酶催化体系由γ-氨基丁酸/α-酮戊二酸转氨酶、谷氨酸脱氢酶和辅酶再生系统组成，
所述辅酶再生系统为：以葡萄糖脱氢酶为辅酶再生酶、以葡萄糖为辅酶再生底物、包含NADH和NAD+的葡萄糖脱氢酶辅酶再生系统；或，以醇脱氢酶为辅酶再生酶、以异丙醇为辅酶再生底物、包含NADH和NAD+的醇脱氢酶辅酶再生系统；或者，以甲酸脱氢酶为辅酶再生酶、以甲酸盐为辅酶再生底物、包含NADH和NAD+的甲酸脱氢酶辅酶再生系统。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酶催化体系中的γ-氨基丁酸/α-酮戊二酸转氨酶、谷氨酸脱氢酶和辅酶再生酶为离体酶、固定化酶或工程菌表达的酶。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述γ-氨基丁酸/α-酮戊二酸转氨酶来源于大肠杆菌、枯草芽孢杆菌或巨大芽孢杆菌。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述γ-氨基丁酸/α-酮戊二酸转氨酶来源于大肠杆菌(E.coli)K12W3110、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)168或巨大芽孢杆菌(Bacillus magaterium)YYBM1。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述谷氨酸脱氢酶来源于大肠杆菌、枯草芽孢杆菌或假单胞菌。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述谷氨酸脱氢酶来源于大肠杆菌(E.coli)K12W3110或枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)168或假单胞菌(Pseudomonasentomophila str.)L48。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述葡萄糖脱氢酶来源于巨大芽胞杆菌；所述醇脱氢酶来源于乳酸杆菌；所述甲酸脱氢酶来源于博伊丁假丝酵母。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，催化体系中，以酶活力为单位，所述γ-氨基丁酸/α-酮戊二酸转氨酶、谷氨酸脱氢酶和辅酶的添加量均为100～100000U/L。
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