[发明专利]一种适合于大豆蛋白磷含量的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及食品技术领域，尤其涉及一种适合于大豆蛋白磷含量的测定方法。

背景技术

按照国标GB/T 5009.87-2003食品中磷的测定 用亚硫酸钠、对苯二酚检测磷，实验过程中，有异味，检测人员头痛、难受，必须戴上防毒面罩。为了保护检验人员的身体健康，保护环境，不再使用亚硫酸钠、对苯二酚有毒试剂，而使用抗坏血酸（维生素C）做还原剂，代替上述两种试剂。

发明内容

为了解决现有技术中的不足，本发明的目的在于提供一种适合于大豆蛋白磷含量的测定方法，测定过程不需要使用有毒试剂，保障了检验人员的身体健康和工作环境。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种适合于大豆蛋白磷含量的测定方法，其特征在于，包括了以下步骤：

试样消解：称取均匀大豆蛋白干样0.1~0.5g或大豆蛋白湿样2~5g并置于25ml消化管内，向消化管内加10ml硝酸-高氯酸混合酸并加盖小漏斗，放置30min；将消化管置于电热板上低温缓缓加热，待样品溶解后，再升温继续消化，如样品未消化完全而硝酸-高氯酸混合酸过少，取下消化管，冷却至室温，再补加几毫升硝酸-高氯酸混合酸消化液，继续置于电热板上加热消化，直至无色透明为止方可取下消化管冷却，冷却至室温后再向消化管内加6ml水并通过电热板进行加热赶酸；然后取下消化管冷却至室温，将消化管内部溶液转移至50ml容量瓶，用水多次洗涤消化管，洗液倒入容量瓶，加水至50ml刻度，混匀，获得试样消化液；同时，取10ml硝酸-高氯酸混合酸，进行消化，获得空白溶液；

试样的测定：准确吸取试样消化液1~5ml及同量的空白溶液分别置于50ml容量瓶中，加入2ml钼酸铵溶液，摇匀，加入1ml抗坏血酸溶液，摇匀，稀释至50ml刻度，放置30min后，用1cm比色皿，以空白溶液调节零点，于分光光度计660nm波长处测定吸光度；

将测定获得的样品吸光度导入至磷含量与吸光度的直线回归方程中获得磷的含量。

所述的硝酸-高氯酸混合酸按照硝酸与高氯酸的体积比为4:1的比例混合获得。

该方法的测定原理：大豆蛋白样品经酸消解，在酸性条件下，磷与钼酸铵结合生成磷钼酸铵，此化合物被抗坏血酸还原成蓝色化合物—钼蓝，用分光光度计在波长660nm处测定钼蓝的吸光度，其吸光度与磷的含量成正比，与标准系列比较定量。

本发明的有益效果是：通过该方法的测定过程不需要使用有毒试剂，保障了检验人员的身体健康和工作环境。

具体实施方式

以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效。

一种适合于大豆蛋白磷含量的测定方法，包括了以下步骤：

首先对该测定方法中所使用的试剂进行如下准备：

硝酸-高氯酸混合酸：硝酸-高氯酸混合酸按照硝酸与高氯酸的体积比为4:1的比例混合获得；

15%硫酸溶液：吸取15ml硫酸缓缓加入到80ml水中混匀，冷却后用水稀释至100ml；

钼酸铵溶液：称取5g钼酸铵，用15%硫酸溶液稀释至100ml；

抗坏血酸溶液：称取5g抗坏血酸，加水溶解，稀释至100ml，此溶液棕色瓶盛装，4℃保存，如果变色则不得使用；

磷标准储备液100ug/ml：准确称取105℃下干燥至恒重的磷酸二氢钾（基准）0.4394g，置于1000ml容量瓶中，加水溶解，稀释至1000ml刻度，混匀；

磷标准使用液10ug/ml：准确吸取10ml磷标准储备液100ug/ml，置于100ml容量瓶中，加水，稀释至100ml刻度，混匀；

试样消解：称取均匀大豆蛋白干样0.1~0.5g或大豆蛋白湿样2~5g并置于25ml消化管内，向消化管内加10ml硝酸-高氯酸混合酸并加盖小漏斗，放置30min；将消化管置于电热板上低温缓缓加热，待样品溶解后，再升温继续消化，如样品未消化完全而硝酸-高氯酸混合酸过少，取下消化管，冷却至室温，再补加几毫升硝酸-高氯酸混合酸消化液，继续置于电热板上加热消化，直至无色透明为止方可取下消化管冷却，冷却至室温后再向消化管内加6ml水并通过电热板进行加热赶酸；然后取下消化管冷却至室温，将消化管内部溶液转移至50ml容量瓶，用水多次洗涤消化管，洗液倒入容量瓶，加水至50ml刻度，混匀，获得试样消化液；同时，取10ml硝酸-高氯酸混合酸，进行消化，获得空白溶液；