[发明专利]肿节风浸膏残渣多糖、其制备方法及用途在审
申请号: | 201710135706.2 | 申请日: | 2017-03-07 |
公开(公告)号: | CN108570113A | 公开(公告)日: | 2018-09-25 |
发明(设计)人: | 高向东;刘玮 | 申请(专利权)人: | 中国药科大学 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A61K31/715;A61P3/10 |
代理公司: | 南京艾普利德知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32297 | 代理人: | 周海斌 |
地址: | 210009*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 肿节风 制备 葡萄糖苷酶抑制剂 制备治疗糖尿病 资源化利用 多糖精品 分级沉淀 粗品 可用 | ||
1.肿节风浸膏残渣多糖的制备方法,其特征是,包括以下步骤:取肿节风浸膏残渣,60℃±10℃干燥后粉碎成粉末;向粉末中加入至少100倍重量的去离子水,加热搅拌溶解完全后,离心去除沉淀得上清液;向上清液中加入至少4倍体积无水乙醇醇沉,1℃-4℃放置至少24小时,离心后取沉淀;将沉淀以无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤,干燥后所得固体即为肿节风浸膏残渣多糖粗品SCRP;所述肿节风浸膏残渣多糖粗品SCRP的多糖含量为总固体重量的50%以上;其中,所述肿节风浸膏残渣为将肿节风浸膏的水提取液醇沉后所得沉淀。
2.由权利要求1所述制备方法制得的肿节风浸膏残渣多糖,其特征是,所述肿节风浸膏残渣多糖为肿节风浸膏残渣多糖粗品SCRP,多糖含量为总固体重量的50%以上。
3.肿节风浸膏残渣多糖的制备方法,其特征是,包括以下步骤:
第一步、取肿节风浸膏残渣,干燥粉碎成粉末;向粉末中加入去离子水,加热搅拌溶解完全后,离心去除沉淀得上清液;向上清液中加入无水乙醇,使乙醇体积浓度达到30±5%,1℃-4℃放置至少24小时,离心后得上清液和沉淀;其中,所述肿节风浸膏残渣为将肿节风浸膏的水提取液醇沉后所得沉淀;
第二步、取第一步所得沉淀,将沉淀以无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤并干燥成固体;将该固体溶于20-50倍重量的去离子水,离心取上清液;向上清液中加入D101大孔吸附树脂,室温下搅拌0.5-3小时;固液分离后取液体,将该液体浓缩后,加入4-6倍体积的无水乙醇,1℃-4℃放置至少24小时,离心取沉淀,将沉淀以无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤并干燥成固体,备用;
第三步、取第二步所得备用的固体,将其溶于去离子水后,上DEAE-52阴离子交换柱;先以去离子水洗脱,再以0-2±0.5mol/L NaCl溶液梯度洗脱,收集NaCl洗脱的糖峰,浓缩后透析24-36小时;浓缩透析液,以至少4倍体积无水乙醇醇沉,1℃-4℃放置至少24小时,离心后取沉淀,将沉淀以无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤并干燥成固体,即得肿节风浸膏残渣多糖精品SCRP30;所述肿节风浸膏残渣多糖精品SCRP30的多糖含量为总固体重量的99%以上。
4.由权利要求3所述制备方法制得的肿节风浸膏残渣多糖,其特征是,所述肿节风浸膏残渣多糖为肿节风浸膏残渣多糖精品SCRP30,多糖含量为总固体重量的99%以上;数均分子量为6.35±0.5×106Da;单糖组成按重量百分比由2±0.5%岩藻糖、5±1%鼠李糖、7±1.5%阿拉伯糖、11±2.5%半乳糖、5±1%葡萄糖、0.6±0.15%甘露糖、6±1.2%木糖、44±7.5%半乳糖醛酸、16±3.5%葡萄糖醛酸构成;糖苷键键型包括α(1→4)半乳糖醛酸、α(1→4)半乳糖醛酸甲酯、α(1→5)阿拉伯糖、β(1→3)半乳糖、α(1→4)葡萄糖,β(1→4,6)葡萄糖,β(1→6)葡萄糖和α(1→2)鼠李糖。
5.肿节风浸膏残渣多糖的制备方法,其特征是,包括以下步骤:
第一步、取肿节风浸膏残渣,干燥粉碎成粉末;向粉末中加入去离子水,加热搅拌溶解完全后,离心去除沉淀得上清液;向上清液中加入无水乙醇,使乙醇体积浓度达到30±5%,1℃-4℃放置至少24小时,离心后得上清液和沉淀;其中,所述肿节风浸膏残渣为将肿节风浸膏的水提取液醇沉后所得沉淀;
第二步、取第一步所得上清液,向其中加入无水乙醇,使乙醇体积浓度达到60±5%,1℃-4℃放置至少24小时,离心后得上清液和沉淀;
第三步、取第二步所得沉淀,将沉淀以无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤并干燥成固体;将该固体溶于去离子水,将其溶于去离子水后,上DEAE-52阴离子交换柱;先以去离子水洗脱,再以0-2±0.5mol/L NaCl溶液梯度洗脱,收集NaCl洗脱的糖峰,浓缩后透析24-48小时;浓缩透析液,以至少4倍体积无水乙醇醇沉,1℃-4℃放置至少24小时,离心后取沉淀,将沉淀以无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤并干燥成固体,即得肿节风浸膏残渣多糖精品SCRP60;所述肿节风浸膏残渣多糖精品SCRP60的多糖含量为总固体重量的90%以上。
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