[发明专利]miR‑378抑制心肌肥厚和心肌纤维化并诊断心力衰竭的用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种心肌内源性的非编码小RNA保护心脏的用途，尤其涉及miR-378抑制心肌肥厚和心肌纤维化，并诊断心力衰竭的用途。

背景技术

心血管疾病是当今人类健康第一杀手，在中国，心血管病患病率处于持续上升阶段。心肌重构是导致心血管疾病发病及死亡率升高的独立危险因素。控制心肌重构的发生发展，是防治心力衰竭发生的关键环节，是预防和治疗心血管疾病的医学与生物学的重要任务之一。

心肌重构是心脏功能从代偿期向失代偿期演变的关键时期，也是心脏结构从可逆向不可逆发展的关键阶段，是心功能受损并发生心力衰竭的病理生理基础。心肌重构通常表现为心肌细胞肥大、细胞外基质胶原沉积和纤维化、心肌细胞的凋亡与坏死，最终的结果是心脏的病理性增大、心肌收缩力下降，心功能失代偿，即心力衰竭。多种心血管疾病包括高血压、心肌梗死、心脏瓣膜疾病等都会导致心肌重构的发生，它是心血管疾病的一种综合性表现。当心脏在损伤因素的刺激下，心肌内源性的保护因子会被激活，发挥抗心肌重构作用。寻找这些保护因子及作用途径，有助于我们发现心脏疾病治疗的有效药物靶点，也有助于我们发现诊断心脏疾病发生的生物标志物。

MicroRNA(简称miRNA)是一种广泛存在于真核生物中，长度约为21nt的内源单链小分子RNA，属于非编码RNA。作为一种基因表达的调控因子，miRNA可以参加很多重要的生理过程，它们疾病中重要作用越来越受到人们的关注。许多研究表明miRNA对于维持心脏正常的生理功能具有重要作用，同时当其表达异常时与很多心脏疾病的发生密切相关。

目前，很多的miRNA作为人类疾病的生物标志物和治疗靶点被相继发现，但在心肌肥厚和心肌纤维化相关疾病中的miRNA发现甚少，其发挥的生物学作用及对心肌病变的诊断价值仍需要科研人员去挖掘，进而研发针对这些靶点的临床药物及诊断试剂，具有潜在的临床应用价值。

目前有关抗心肌重构，包括心肌肥厚、心肌纤维化的心肌内源miRNA研究甚少，而其重要的生物学作用和治疗疾病的靶点有待发掘。miRNA作为生物体的非编码小片段RNA较传统的分子标记物在疾病诊断中具有的优势包括其具灵敏性、发病不同阶段的表达特异性、稳定性、易检测性等特点，是较理想的疾病诊断标志物。然而目前在心力衰竭以及心衰发生不同阶段所开发出来的miRNA分子诊断试剂仍处于起步阶段，所发现的与心衰发生相关的血清miRNA的数量极其有限，发现新的心衰诊断标志物对于心脏疾病的预防和治疗十分重要。

发明内容

有鉴于本技术领域中存在的上述缺陷，本发明提供了一种miRNA在预防或治疗心肌肥厚、心肌纤维化中的应用；其中，所述miRNA具体是指miR-378，其序列为：5’-CUCCUGACUCCAGGUCCUGUGU-3’(SEQ No.1)，本发明提供了miR-378在制备预防或治疗心肌肥厚、心肌纤维化的药物或试剂盒中的用途，并进一步提供了miR-378作为心力衰竭生物标志物的用途。

本发明通过实验发现miR-378在心肌肥厚和肥大的心肌细胞中显著下调。miR-378在心肌组织中高表达，并且在心肌细胞中特异性表达。在动物水平，利用化学修饰的miR-378模拟物和抑制剂通过静脉注射的方式分别干预肥厚刺激的野生C57b/L6小鼠，发现miR-378可以显著抑制心肌肥厚和心肌纤维化，miR-378基因敲除小鼠在肥厚因素刺激下对于野生型小鼠表现出更严重的心肌重构，即加重的肥大表现及纤维化程度；在细胞水平，心肌细胞过表达miR-378能显著抑制心肌细胞肥大，心肌成纤维细胞过表达miR-378能显著抑制细胞的纤维化反应。

进一步，本发明还提供了miR-378模拟物/合成的miR-378核酸序列在制备预防或治疗心肌肥厚、心肌纤维化的药物或试剂盒中的用途，优选地，所述miR-378模拟物/合成的miR-378核酸序列经过化学修饰，如与胆固醇、纳米颗粒、脂质体等修饰连接。

在本发明的一种优选实施方式中，所述miR-378模拟物在反义链3’端进行胆固醇修饰，5’端两个硫代骨架修饰，3’端四个硫代骨架修饰，全链甲氧基修饰。

进一步，所述预防或治疗心肌肥厚、心肌纤维化的药物通过静脉或肌肉注射等方式，对心肌肥厚和心肌纤维化等心脏疾病进行治疗。