[发明专利]净化伏马毒素B1、黄曲霉毒素B1等五种真菌毒素免疫吸附剂及复合亲和柱

说明书

本发明涉及净化伏马毒素B1、黄曲霉毒素B1等五种真菌毒素免疫吸附剂及复合亲和柱。所述的免疫吸附剂包括固相载体和与该固相载体上偶联的伏马毒素B1单克隆抗体、黄曲霉毒素B1单克隆抗体、赭曲霉毒素A单克隆抗体、玉米赤霉烯酮单克隆抗体和杂色曲霉毒素单克隆抗体，所述的伏马毒素抗体为由保藏编号为CCTCC NO.C201636的杂交瘤细胞株Fm7A11分泌产生的单克隆抗体,所述的杂交瘤细胞株Fm7A11已于2016年3月29日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是，中国，武汉，武汉大学，保藏编号为CCTCC NO.C201636。此复合亲和柱可同时用于伏马毒素B1、黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮、杂色曲霉毒素样品的净化检测。

技术领域

本发明涉及一种净化伏马毒素B1、黄曲霉毒素B1等五种真菌毒素免疫吸附剂及复合亲和柱。

背景技术

伏马毒素是由镰刀菌属在一定的温度和湿度下产生的水溶性代谢产物，是一类由不同的多氢醇和丙三羧酸组成结构类似的双酯化合物。伏马毒素能在较低的浓度范围内干扰植物正常生理功能，是对植物代谢有毒害作用的非酶类化合物，属于真菌毒素和非寄主专化型毒素。主要分布在以玉米、高粱、小麦为主的农作物上，可造成秧苗枯萎，根、茎、种子腐烂等农业经济损失。伏马毒素对畜禽和实验动物可引起各种具有特异性的毒理作用，如马、兔的脑白质软化症，其表现为:神经性中毒，意识障碍、失明和运动失调等症状，严重者甚至造成死亡。还可造成猪的肺水肿和水胸，肝脏和食道损伤伏马毒素还可引起灵长类动物的动脉粥样硬化，鼠、羔羊、小牛的肝细胞凋亡和肾毒性，还有肝毒性和致癌效应，给畜牧业带来严重经济损失。

黄曲霉毒素是黄曲霉和寄生曲霉等产生的一组结构类似的次生代谢产物，是一组以二吠喃香豆素为基本结构的化合物，广泛存在于粮食谷物和饲料及其加工品中，在目前已知的两百多种真菌毒素中毒性最强、污染频率最高。黄曲霉毒素具有诱导突变、抑制免疫和致癌的作用。而黄曲霉毒素B1(AFB1)的毒性和致癌性最强，其作用的靶器官主要是肝脏，被公认为致肝癌物质，长期食用含有低水平黄曲霉毒素食物的人其肝脏也将受到损害。国际癌症中心将其定为一类致癌剂。

赭曲霉毒素是由赭曲霉和纯绿青霉产生的一种霉菌肾毒素，可分为A和B两种类型，A的毒性较大。赭曲霉毒素在4℃的低温下赭曲霉即可产生具有毒害作用浓度的赭曲霉毒素。动物摄入1ppm体重剂量的赭曲霉毒素A可在5～6天致死。常见的病变是肾小管上皮损伤和肠道淋巴腺体坏死。饲喂含1ppm浓度赭曲霉毒素的日粮3个月可引起动物烦渴、尿频、生长迟缓和饲料利用率降低；饲喂含量低至200ppb的日粮数周可检测到肾损伤。其他的临床症状还有腹泻、厌食和脱水。有时临床症状不明显，而在赭曲霉毒素中毒呈地方流行病的地区，动物在屠宰时惟一可观察到的病变是肾苍白、坚硬。

玉米赤霉烯酮又称F-2毒素,它首先从有赤霉病的玉米中分离得到.玉米赤霉烯酮其产毒菌主要是镰刀菌属的菌侏,如禾谷镰刀菌和三线镰刀菌.玉米赤霉烯酮主要污染玉米,小麦,大米,大麦,小米和燕麦等谷物,其中玉米的阳性检出率为45％,最高含毒量可达到2909mg/kg；小麦的检出率为20％,含毒量为0.364～11.05mg/kg.玉米赤霉烯酮的耐热性较强,110℃下处理1h才被完全破坏.玉米赤霉烯酮具有雌激素作用,主要作用于生殖系统,可使家畜,家禽和实验小鼠产生雌性激素亢进症.妊娠期的动物(包括人)食用含玉米赤霉烯酮的食物可引起流产,死胎和畸胎.食用含赤霉病麦面粉制作的各种面食也可引起中枢神经系统的中毒症状,如恶心,发冷,头痛,神智抑郁和共济失调等。