[发明专利]一种基于肿瘤抗原ECM1的长肽ERE1及其在肿瘤免疫治疗中的应用

说明书

本发明涉及肿瘤的免疫治疗领域，尤其涉及一种基于肿瘤抗原ECM1的长肽ERE1及其在肿瘤免疫治疗中应用，特别涉及通过肿瘤肽疫苗特异性诱导、刺激活化生物体肿瘤特异性T淋巴细胞，激发、增强生物体抗肿瘤免疫功能及其在特异性抗肿瘤免疫治疗中的应用，具体为所提供的HLA‑A2限制性免疫靶向ECM1的长肽ERE1可用于研制靶向抗原ECM1的治疗性肽疫苗，为上皮样恶性肿瘤精准免疫治疗提供理论基础。

技术领域

本发明涉及肿瘤的免疫治疗领域，尤其涉及一种基于肿瘤抗原ECM1的长肽ERE1及其在肿瘤免疫治疗中的应用，特别涉及通过肿瘤肽疫苗特异性诱导、刺激活化生物体肿瘤特异性T淋巴细胞，激发、增强生物体抗肿瘤免疫功能及其在特异性抗肿瘤免疫治疗中的应用。

背景技术

肿瘤发病率、死亡率呈逐年上升趋势，目前癌症已经成为严重威胁人类健康的头号杀手。尽管肿瘤的手术治疗、化疗、放射治疗及分子靶向治疗不断取得进展，但肿瘤的有效治疗仍是亟待解决的关键问题。近年来，随着人们对肿瘤的分子机理和免疫机制的不断揭示，肿瘤特异的免疫治疗日益受到重视，而获得理想肿瘤抗原是肿瘤免疫治疗的关键。随着免疫学理论方法和分子生物学方法的飞速发展，大量可以诱导机体免疫应答的肿瘤抗原的发现，为肿瘤免疫治疗开辟了新纪元。

细胞外基质蛋白-1（ECM1）是1994年Mathieu等从鼠的成骨基质细胞株MN7中分离出来的一种分泌型糖蛋白，相对分子质量为85KD。ECM1蛋白质参与多种生物学过程，包括细胞增殖，血管生成，胚胎软骨的形成，皮肤分化等。近年来研究表明，ECM1在乳腺癌、甲状腺癌、喉癌、肝癌、胆管癌、胃癌、结直肠癌、肺癌等多种上皮样恶性肿瘤中高表达，因此，ECM1可作为肿瘤相关抗原成为肿瘤免疫治疗靶点。

近年来，随着对免疫应答分子机制研究的深入，现已逐渐认识到机体的免疫细胞并不是对应于各种各样的病原体或天然抗原的整体分子，而是针对各种各样抗原分子的抗原表位，即蛋白质抗原是通过其表位来体现其免疫特异性。研究表明，CD8+ T细胞所识别的肿瘤抗原需先经抗原提呈细胞处理，之后以“抗原肽-MHC-I类分子”复合物的形式呈现在抗原提呈细胞或靶细胞表面，相应的与MHC-I类分子结合的抗原肽即为CTL表位。肿瘤抗原来源的CTL表位肽能够激活诱导产生特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL细胞），可对人类白细胞抗原（HLA）配型匹配的肿瘤产生杀伤作用。中国人群中MHC-I类最常见的亚型型为HLA-A2。因此，筛选HLA-A2限定性CTL表位，实现靶向肿瘤抗原的免疫治疗也成为目前肿瘤免疫治疗的热点。

由于单独肿瘤抗原CTL表位肽分子量小，不稳定，在体内迅速被水解，其免疫效能有限，因此提升CTL表位肽的免疫活性是目前亟待解决的问题。研究表明，通过氨基酸替换修饰可增强 CTL 表位诱导的靶向抗肿瘤效应。例如，利用氨基酸替换修饰 HLA-A2限制性肿瘤抗原 Ran 表位的氨基酸序列可提升其免疫活性，同样利用氨基酸替换修饰肿瘤抗原POTE来源 HLA-A2限制性CTL表位也获得了免疫活性提升的修饰性表位。另有研究表明，延长表位的氨基酸序列长度也是提升表位活性的有效途径，例如肿瘤抗原CDCA1、KIF20A来源的多表位长肽均显著提升单独CTL表位活性。长肽一般是由大于20个氨基酸的肽段组成，较CTL表位肽(9-10个氨基酸)长，所以长肽进入体内后必须经活化的专职APC加工提呈使T细胞有效活化，而不能像表位肽那样可直接结合在表达MHC分子的细胞上，这样可以减少免疫耐受的发生。长肽片段中存在多个表位，可更有效的产生特异、持久的细胞免疫应答。由于长肽具有CTL表位肽无法比拟的优势，将有可能取代CTL表位用于肿瘤患者的免疫治疗。因此，研发高效、低度的肿瘤抗原来源的长肽，用于肿瘤免疫靶向治疗成为目前研究热点之一。

发明内容

针对上述问题，本发明目的在于提供一种基于肿瘤抗原ECM1的长肽ERE1,具体为HLA-A2限制性免疫靶向ECM1的长肽ERE1，其特征是可诱导ECM1特异性CTL细胞，发挥HLA-A2限制性肿瘤杀伤作用。本发明提供的HLA-A2限制性免疫靶向ECM1的长肽ERE1可用于研制靶向抗原ECM1的治疗性肽疫苗，为上皮样恶性肿瘤精准免疫治疗提供理论基础。