[发明专利]一种化疗药物相关分子特异性蛋白芯片及制备方法与应用在审
申请号: | 201710129140.2 | 申请日: | 2017-03-06 |
公开(公告)号: | CN107064519A | 公开(公告)日: | 2017-08-18 |
发明(设计)人: | 林靖;冯怀志;李健;李硕;宋朝理;贺华;卢亦成 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第四五二医院 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/574;G01N33/50 |
代理公司: | 上海精晟知识产权代理有限公司31253 | 代理人: | 冯子玲 |
地址: | 610021 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 化疗 药物 相关 分子 特异性 蛋白 芯片 制备 方法 应用 | ||
1.一种化疗药物相关分子特异性蛋白芯片,其特征在于,所述蛋白芯片上固定的是针对肿瘤耐药基因制备的抗体,所述肿瘤耐药基因是由和所述化疗药物的反应性、细胞毒性相关的分子所参与的细胞信号通路信息与所述肿瘤接受化疗后生存期相关的差异基因进行重叠而获得。
2.根据权利要求1所述的化疗药物相关分子特异性蛋白芯片,其特征在于,所述肿瘤为胶质瘤。
3.根据权利要求1或2所述的化疗药物相关分子特异性蛋白芯片,其特征在于,所述化疗药物选自司莫司汀、卡莫司汀和替莫唑胺中的一种或几种。
4.根据权利要求1或2所述的化疗药物相关分子特异性蛋白芯片,其特征在于,所述化疗药物为替莫唑胺。
5.一种化疗药物相关分子特异性蛋白芯片的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:
步骤1、将和所述化疗药物的反应性、细胞毒性相关的分子所参与的细胞信号通路信息与所述肿瘤接受化疗后生存期相关的差异基因进行重叠,筛选出感兴趣的肿瘤耐药基因;
步骤2、针对步骤1中获得的所述肿瘤耐药基因制备人源单克隆抗体;
步骤3、将步骤2中制备的所述人源单克隆抗体固定在涂有小牛血清蛋白和多聚支持物的载玻片上,制得蛋白芯片;
步骤4、将步骤3中制得的所述蛋白芯片浸泡于小牛血清蛋白缓冲液,以消除非特异结合。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述肿瘤为胶质瘤。
7.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述化疗药物为替莫唑胺。
8.根据权利要求1或2所述的化疗药物相关分子特异性蛋白芯片在检测分析肿瘤获得性耐药相关分子中的应用,其特征在于,所述应用包括以下步骤:
步骤1、用所述化疗药物诱导培养肿瘤耐药细胞株,另设立亲本肿瘤细胞作为对照组;
步骤2、对所述肿瘤耐药细胞株和所述亲本肿瘤细胞进行蛋白检测,包括蛋白质抽提和标记、芯片杂交和扫描芯片获得差异蛋白;
步骤3、生物信息分析。
9.根据权利要求4所述的化疗药物相关分子特异性蛋白芯片在检测分析肿瘤获得性耐药相关分子中的应用,其特征在于,所述应用包括以下步骤:
步骤1、用替莫唑胺诱导培养肿瘤耐替莫唑胺细胞株,另设立亲本肿瘤细胞作为对照组;
步骤2、对所述肿瘤耐替莫唑胺细胞株和所述亲本肿瘤细胞进行蛋白检测,包括蛋白质抽提和标记、芯片杂交和扫描芯片获得差异蛋白;
步骤3、生物信息分析。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述肿瘤为胶质瘤,培养的细胞为胶质瘤U251细胞。
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