[发明专利]一种具有免疫治疗功能的微纳米组织工程支架及其制备方法

说明书

本发明提供了一种具有免疫治疗功能的微纳米组织工程支架及其制备方法。该具有免疫治疗功能的支架是由静电纺纤维支架表面通过表面活化改性嫁接接枝抗体制备而成。制备方法包括以下步骤：（1）静电纺丝支架的制备；（2）静电纺丝支架的表面活化改性；（3）抗体的接枝。通过静电纺丝支架表面接枝抗体，一方面通过抗体的释放直接诱导肿瘤细胞的凋亡，同时抗体释放可诱导肿瘤微环境中树突状细胞活化，激发特异性免疫应答，释放细胞因子和活化杀伤性T细胞杀伤肿瘤，间接实现抑制肿瘤细胞生长效应；另一方面释放抗体后的支架，为组织再生提供固相载体，诱导新生组织再生。最终实现生物支架的免疫调节抑制肿瘤和促进新组织再生的双重功能。

技术领域

本发明涉及医用材料领域，具体涉及一种具有免疫治疗功能的微纳米组织工程支架及其制备方法。

背景技术

以抗体为主的免疫治疗指的是通过抗体调控机体免疫系统，增强或抑制免疫应答能力，治疗疾病的一种方法。肿瘤免疫治疗通过调动机体的免疫系统，增强肿瘤微环境抗肿瘤免疫力，从而控制和杀伤肿瘤细胞。相反，通过特异性抗体抑制免疫应答来治疗自身免疫性疾病也是抗体应用的重要领域。目前抗体靶向治疗已在白血病、胃癌、肺癌等肿瘤患者和类风湿关节炎患者广泛应用。相对于化学药物治疗肿瘤，抗体治疗肿瘤具有特异性好，毒副作用相对较小，可预测、可依从性好,激活自体免疫系统发挥疗效等优点。但是由于肿瘤具有极大的异质性和遗传的不稳定性，单纯使用抗体难以达到理想的效果。为了提高抗体在临床中的应用，研究人员已经将单抗、细胞因子和化疗药物等联合应用，通过静脉、腹腔等注射方式进入体内以诱导有效的免疫反应，增强对肿瘤的杀伤力。然而，由于抗体半衰期短，弥散速度快，难于作用在局部，会降低治疗肿瘤的效果；同时存在使用剂量高，造成全身副作用、经济负担重等缺点。因此，如何将高浓度抗体局限于实体肿瘤局部发挥效应成为当前肿瘤治疗的难点。此外，肿瘤治疗过程中新组织的再生和重建，是加快原位组织修复的一个过程。因此，如何开发一种具有免疫肿瘤治疗和原位新生组织重建的治疗方法，具有治疗和重建的综合性功能。

生物支架具有细胞外基质替代的作用，能为正常细胞体外生长提供三维支架，还可以通过支架上装载药物实现局部疾病治疗，从而达到疾病治疗、组织再生等联合作用效果。静电纺丝微纳米纤维具有比表面积大、三维微纳米结构、灵活载药方式等，已经在组织重建、再生、疾病治疗等方面得到了广泛的研究。近期，采用静电纺纤维相关的免疫治疗已经有相关研究，例如Ma等通过氧化处理方法在静电纺纤维表面共价吸附蛋白A/G来募集抗体。Lu等通过过滤，利用抗体抗原之间的相互作用使抗体固定在静电纺纤维表现。目前，静电纺丝携载抗体的方法主要是表面吸附，然后这些装载存在装载量低、活性保持效率低以及后期灭菌等过程容易使得抗体失活等缺点。从而，难于实现抗体的高效的免疫治疗。

发明内容

要解决的技术问题：本发明针对现有技术中存在的不足，提供一种免疫治疗功能的微纳米组织工程支架，抗体装载量高、活性保持率高、不易失活，具有免疫调节抑制肿瘤和促进新组织再生的双重功能。

技术方案：一种具有免疫治疗功能的微纳米组织工程支架，由静电纺纤维支架表面通过表面活化改性嫁接接枝抗体制备而成。

进一步的，所述的一种具有免疫治疗功能的微纳米组织工程支架，所述的静电纺纤维支架通过聚乳酸PLLA、乳酸-羟基乙酸的共聚物PLGA、聚己内酯PCL中的任一种纺丝原料制备而成。

进一步的，所述的一种具有免疫治疗功能的微纳米组织工程支架，所述的抗体为具有免疫调节作用的IgG类抗体。

进一步的，所述的一种具有免疫治疗功能的微纳米组织工程支架，所述的具有免疫调节作用的IgG类抗体为CD40抗体、CD28抗体、或CD80抗体。

进一步的，所述的一种具有免疫治疗功能的微纳米组织工程支架的制备方法，包括以下步骤：

（1）静电纺丝支架的制备：通过静电纺丝装置进行静电纺丝，制备静电纺纤维支架；