[发明专利]苗期水培接种快速鉴定番茄颈腐根腐病抗性植株的方法

权利要求书

1.一种苗期水培接种快速鉴定番茄颈腐根腐病抗性植株的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)准备待鉴定番茄幼苗；以不同番茄品系为材料，各品系选取健康饱满的番茄种子20-30粒，放入培养皿中，加水没过番茄种子，将培养皿放入25℃培养箱中催芽4d，选取萌发正常的种子播种于灭菌后的育苗培养基质中，进行培养，幼苗长到2-4片真叶，挑选健康、均匀一致的幼苗作为待鉴定番茄幼苗，备用；

(2)制备番茄颈腐根腐病原菌孢子液：将番茄颈腐根腐病原菌接种于PDA培养基中，置于22℃下培养15天，将菌丝刮入到无菌水中，再配制成孢子浓度为1-3×10⁶个孢子/ml的悬液得番茄颈腐根腐病原菌孢子液；

(3)病原菌侵染处理：将步骤(1)的待鉴定番茄幼苗从育苗培养基质中取出，清洗后得自然伤根幼苗，然后将自然伤根幼苗插入以步骤(2)的番茄颈腐根腐病原菌孢子液为培养液的水培装置中，保证仅自然伤根幼苗的根部浸入培养液中；

(4)抗病性检测：分别于侵染处理后的3天、4天、5天、6天，调查侵染苗的发病状况，根据番茄颈腐根腐病病情分级标准确定0、1、2、3共4个发病等级，再根据该发病等级计算病情指数，最后根据发病率和病情指数鉴定植株抗病能力。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，每个番茄品系选取6-8株幼苗进行病原菌侵染处理。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)病原菌侵染处理过程中，环境温度控制在22-25℃。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，水培装置选用10mL的离心管，或者高10cm、容积250mL的塑料瓶，或者高10cm、容积250mL的玻璃瓶。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述番茄颈腐根腐病原菌为尖孢镰刀菌番茄颈腐根腐病专化型。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，育苗培养基质采用草炭∶蛭石＝2∶1的体积比混合而成。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，根据病情指数检测植株抗番茄颈腐根腐病的抗性等级，具体分级如下：

病情指数(DI)的计算按如下公式计算：

病情指数＝Σ(级数×发病株数)/(最高病情级数×总株数)×100，式中Σ为和；

按病情指数(DI)分别划分为：高抗(HR)：0＜DI≤10；抗(R)：10＜DI≤20；中等(M)：20＜DI≤40；感(S)：40＜DI≤60；高感(HS)：DI＞60。