[发明专利]一种气管内雾化致豚鼠主动全身过敏模型的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种实验动物过敏模型的制备方法，尤其涉及一种气管内雾化致豚鼠主动全身过敏模型的制备方法。

背景技术

肺部给药由于药物直接以较高浓度到达肺部靶器官，作用直接，起效迅速，且用药量少，能有效减少全身给药所产生的不良反应，是治疗呼吸系统疾病或全身疾病理想的给药途径，在临床上应用已久。因此经呼吸道给药或通过呼吸道染毒是针对吸入制剂药效及进行安全性评价不可或缺的手段。目前，针对临床常用的水雾剂或粉雾剂等吸入制剂的安全性研究较为缺乏，多采用口鼻暴露和全身暴露，此种方法虽然无创但无法精确定量给药剂量，药物容易沉降于暴露塔内损耗较大，另一方面相关仪器及配套发生器价格不菲。传统暴露式气管插管方式需手术暴露气管，不适于长期给药。由此可见针对吸入制剂的安全性评价需要开创一种无创且精确的给药方式。

发明内容

本发明为解决现有技术中的上述问题提出的一种精确定量且无浪费的气管内雾化致豚鼠主动全身过敏模型的制备方法。

为了实现上述技术目的，本发明所采取的技术措施为：

一种气管内雾化致豚鼠主动全身过敏模型的制备方法，包括以下步骤：

步骤一，借助喉镜使用雾化针头经气管内插管，雾化给予卵白蛋白，隔日一次，共三次，使豚鼠致敏；

步骤二，在所述步骤一末次致敏后第14和21天，分别经气管内雾化给予卵白蛋白，从而激发豚鼠产生主动全身过敏，即得豚鼠主动全身过敏模型。

为了优化上述制备方法，本发明所采取的技术措施还包括：

进一步地，所述步骤一为采用MicroSprayer雾化针头经气管内插管，雾化给予卵白蛋白生理盐水溶液；所述步骤一中雾化给予卵白蛋白生理盐水溶液中卵白蛋白浓度为1～4mg/ml，更优选为2mg/ml；雾化给予卵白蛋白生理盐水溶液的剂量为0.2-0.8ml，更优选为0.5ml。

进一步地，所述步骤二为在步骤一末次致敏后第14和21天，采用MicroSprayer雾化针头经气管内插管雾化给予卵白蛋白生理盐水溶液。

进一步地，所述步骤二中雾化给予卵白蛋白生理盐水溶液中卵白蛋白浓度为2～6mg/ml，更优选为4mg/ml；雾化给予卵白蛋白生理盐水溶液的剂量为0.2-1.0ml，更优选为0.5ml。

同时，本发明还可以采用HRH-MAG6型粉尘雾化针头实施，故步骤一为采用HRH-MAG6型粉尘雾化针头经气管内插管，雾化给予卵白蛋白干粉。

进一步地，所述步骤一中雾化给予卵白蛋白干粉的剂量为1～3mg/只，更优选为2mg/只。

进一步地，所述步骤二为在步骤一末次致敏后第14和21天，采用HRH-MAG6型粉尘雾化针头经气管内插管雾化给予卵白蛋白干粉；所述步骤二中雾化给予卵白蛋白干粉的剂量为2-6mg/只，更优选为4mg/只。

本发明中实施气管内插管给予雾化时，借助小动物喉镜在视野内暴露会咽部位，将雾化针头插入气管中，快速并用力推注注射器针芯，使液体呈雾状。注意操作时动作轻柔、迅速，所有器械注意及时消毒。

本发明采用上述技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：

本方法动物处于清醒状态，避免手术创伤，模拟吸入制剂进入动物气管内给药，靶器官唯一，针对性强，重复性好。而且该法可以精确定量药物进入呼吸道是否引起过敏，同时没有多余药物浪费。实验证明效果良好，以气管内雾化OVA生理盐水溶液进行致敏激发，成功地诱发了豚鼠主动全身过敏症状，建立了豚鼠主动全身过敏模型。

具体实施方式

本发明提供了一种气管内雾化致豚鼠主动全身过敏模型的制备方法，包括以下步骤：

步骤一，借助喉镜使用雾化针头经气管内插管，雾化给予卵白蛋白，隔日一次，共三次，使豚鼠致敏；

步骤二，在所述步骤一末次致敏后第14和21天，分别经气管内雾化给予卵白蛋白，从而激发豚鼠产生主动全身过敏，即得豚鼠主动全身过敏模型。

下面通过具体实施例对本发明进行详细和具体的介绍，以使更好的理解本发明，但是下述实施例并不限制本发明范围。

实施例1气管内雾化制备豚鼠主动全身过敏模型

实验动物：

采用豚鼠16只，雌雄各半。Hartley，SPF级，体重300～350g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。

实验用卵白蛋白(OVA)：

购买自SIGMA公司，氯化钠注射液购买自华裕(无锡)制药有限公司。

饲养环境：