[发明专利]牛大力种子直接诱导从芽并快速繁育种苗的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物栽培技术领域，具体涉及牛大力种子直接诱导从芽并快速繁育种苗的方法。

背景技术

牛大力为崖豆藤属美丽崖豆藤的块根，具有舒筋活络，清热止咳，润肺滋肾等功效，分布在广西、广东、海南、台湾、贵州和东南亚，是一种具有良好保健功效的药食两用植物。近年来，由于以牛大力为主要原料生产的壮腰健肾丸、强力健身胶囊等多种中成药，在市场上销量不断增加，导致对其原料的需求量也急剧增加，野生牛大力药材成濒危品种，人工种植牛大力成为必然趋势。目前，牛大力种植面积约3万亩，按每亩种600株苗计，需要1800万株幼苗。由于牛大力的花期和果期均较长，同批采收的种子成熟度不一致，导致牛大力种子发芽极不整齐，有一个月内发芽的，也有半年后发芽的，且发芽率较低，平均在42.5-61.25％之间。

与牛大力组培苗和扦插苗相比，用牛大力种植繁殖的种苗，生长快速、种植头一年直径已有手指大，即形成膨大的主块根(薯块)，种子繁殖苗人工种植牛大力的最佳选择。但目前市面上牛大力种子育苗都是小规模进行，加上种子发芽率低和发芽不整齐，难以满足市场的大规模需求。因此，本发明对满足牛大力种子繁殖苗的市场需求有重要的实际意义。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供牛大力种子直接诱导从芽并快速繁育种苗的方法，该方法可实现牛大力种子规模化育苗，一次可育苗几十万株到几百万株，而且幼苗整齐，种子发芽率在97％以上，成活率在98％以上，育苗总成功率在95％以上，育苗时间可提前1-2个月。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了牛大力种子直接诱导从芽并快速繁育种苗的方法，包括，

初代培养的步骤如下：剪取牛大力半木质化茎条，去掉叶片，剪成3-5cm的长茎段，用水冲洗干净，超声波灭菌7-10min后，用无菌水冲洗5-6次，剪除两端切口，剪成1-1.5em长的带芽茎段，接种到初代培养基，暗培养7-8d后，腋芽萌动，再弱光培养25d，腋芽长到1cm，转移至强光下进行培养30d，腋芽长成1.5-3cm长的单一芽苗，无叶片分化。

从芽增殖培养的步骤如下：将初代培养长成的芽苗茎剪成1.5-2cm的长茎段横放接入到从芽增殖培养基，经过28d的培养，从每个茎段腋芽处萌发5-7个丛生芽，待小芽长至3-6cm，逐渐分化出1-3片复叶。

壮苗培养的步骤如下：剪取高约4cm，有2片复叶的芽苗单株竖放转接到壮苗培养基，弱光下培养5-6d，转移至强光下培养；培养16-20d，苗高4-5cm，叶片浓绿，茎木质化程度高，生长旺盛。

瓶外快速繁的步骤如下：育培养移栽基质按黄心土∶河沙∶泥炭土(10-15∶1∶1)的比例拌匀，用8cm×12cm营养袋装好备用；移栽前一天用0.1％-0.2％高锰酸钾溶液进行消毒，移栽时用清水把基质淋透；移栽前，将瓶内壮苗用清水洗净基部培养基，再置于500mg/L ABT生根粉中浸蘸约1min，扦插在营养袋基质中，立即搭小拱棚覆盖塑料薄膜及黑网，保持苗床温、湿度，棚内相对湿度保持在90％以上，温度控制在30℃以下，移栽1周后，可揭开部分薄膜透气，以后揭开薄膜的面积可逐渐加大，每间隔7d喷施1次杀菌剂及叶面肥，移栽40d出主根2条，生根率达75％-85％；90d后生根苗高达10cm，主根1-4条，多数为2条，粗度达0.15cm，根长最长可达15cm，须根10-20条；180d后，主根膨大成圆柱状或两个纺锤体连成一串，膨大处直径达0.8-1.3cm。

优选的是，所述培养基为MS培养基，所述培养基均加蔗糖3％，pH值5.6-5.8，培养温度(26±1)℃，光照时间12h/d，光照强度400-20001x；所述初代培养基中添加由催生素。

本发明至少包括以下有益效果：

第一、本发明提供的方法，实现了牛大力种子直接诱导从芽并快速繁育种苗，一次可育苗几十万株到几百万株，而且幼苗整齐，种子发芽率在97％以上，成活率在98％以上，育苗总成功率在95％以上，育苗时间可提前1-2个月，解决了牛大力种子发芽不整齐、不能规模化育种和发芽率低的难题；

第二、通过优化培养基并从芽增殖培养，能有效防止牛大力组织培养过程中材料褐化及异常愈伤组织产生，并能促进复叶分化，增加继代苗高度及茎的木质化程度，为瓶外快速繁育提供高质量的有效芽苗。