[发明专利]一种可作为基因载体的两亲性多肽分子有效
申请号: | 201710117069.6 | 申请日: | 2017-03-01 |
公开(公告)号: | CN106916209B | 公开(公告)日: | 2020-05-12 |
发明(设计)人: | 曹美文;徐海;赵文婧;卢沙;谢子龙 | 申请(专利权)人: | 中国石油大学(华东) |
主分类号: | C07K14/00 | 分类号: | C07K14/00;C12N15/87 |
代理公司: | 青岛清泰联信知识产权代理有限公司 37256 | 代理人: | 栾瑜 |
地址: | 266580 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 作为 基因 载体 两亲性 多肽 分子 | ||
1.一种可作为基因载体的两亲性多肽分子,其特征在于,所述两亲性多肽分子为:
Ac-Arg-Gly-Asp-Gly-Pro-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Ile-Ile-Ile-Gly-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-NH2,结构如下:
其中,Arg为精氨酸,Gly为甘氨酸,Asp为天冬氨酸,Pro为脯氨酸,Ala为丙氨酸,Ile为异亮氨酸。
2.根据权利要求1所述的两亲性多肽分子,其特征在于,所述两亲性多肽分子中具有细胞结合能力的为Arg-Gly-Asp片段,具有基质金属蛋白酶响应性的为Gly-Pro-Leu-Gly-Leu-Ala片段,以及具有与基因分子结合并将基因分子转运到细胞内部的为Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg片段。
3.根据权利要求1所述的两亲性多肽分子,其特征在于,所述两亲性多肽分子在pH为7.0的Tris缓冲液中,浓度在0.015-1.0mM之间时,呈球状聚集体结构,直径为5-100nm。
4.一种由权利要求1-3任一项所述的可作为基因载体的两亲性多肽分子所制备得到的基因转染试剂。
5.一种由权利要求1-3任一项所述的可作为基因载体的两亲性多肽分子在制备基因转染试剂中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述两亲性多肽分子在浓度100μM以下对人体细胞作用时间≤6小时时不具有毒性。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述人体细胞选自人胚肾细胞293E、人肺癌细胞A549、人宫颈癌细胞Hela和人肝癌细胞Hepg2中的至少一种。
8.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述两亲性多肽分子在与λ-DNA分子混合时,混合体系在600nm波长处的荧光强度随所述两亲性多肽分子所带正电荷数量与λ-DNA分子所带负电荷数量的比值的增加而减小,并在比值在3-5之间达到平衡,使λ-DNA分子由伸展构象转变为凝聚构象。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,混合体系达到平衡时,λ-DNA分子与所述两亲性多肽分子的复合物结构呈球状或棒状,尺寸为50-200nm。
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