[发明专利]一种利用氯化氨溶液从螺旋藻中提取藻蓝蛋白的方法在审
申请号: | 201710116912.9 | 申请日: | 2017-03-01 |
公开(公告)号: | CN106749633A | 公开(公告)日: | 2017-05-31 |
发明(设计)人: | 敬科举;唐圆玮;朱先锋;郭立;卢英华 | 申请(专利权)人: | 厦门大学 |
主分类号: | C07K14/795 | 分类号: | C07K14/795;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所11569 | 代理人: | 王加贵 |
地址: | 361000 福建*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 氯化氨 溶液 螺旋藻 提取 蛋白 方法 | ||
1.一种利用氯化氨溶液从螺旋藻中提取藻蓝蛋白的方法,包括以下步骤:
1)将螺旋藻进行酶解破壁,得到破壁螺旋藻;
2)将所述破壁螺旋藻与氯化铵溶液混合,将藻蓝蛋白萃取到氯化铵溶液中,超滤得到藻蓝蛋白上清液;
3)采用磷酸铵溶液对所述藻蓝蛋白上清液进行盐析,将得到的盐析产物脱盐后干燥,得到藻蓝蛋白。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述螺旋藻在光反应器培养得到,所述酶解破壁前将培养得到的螺旋藻进行陶瓷膜过滤;
所述陶瓷膜过滤的温度为20~30℃,切向流速为3~5m/s,过膜压力为0.6~0.9bar。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1)酶解破壁用酶为复合酶,所述复合酶包括纤维素酶、果胶酶和溶菌酶;所述酶解时间为3~5h,所述酶解温度为30~40℃。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤2)破壁螺旋藻与氯化铵溶液的体积比为1∶(2~3);所述氯化铵溶液的浓度为0.05~0.1mol/L,pH值为7~8。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤2)萃取包括搅拌过程,所述搅拌的时间为4~6h,转速为50~80rpm。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤2)的超滤采用直径为0.4~0.1μm的超滤膜进行。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤3)盐析过程中藻蓝蛋白上清液与磷酸铵溶液的体积比为1∶(2~3);所述磷酸氨溶液的浓度为0.1~0.5mol/L,pH值为4.0~4.5;所述盐析的温度为15~20℃。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤3)的盐析反应进行搅拌,所述搅拌的反应时间为1~2h,转速为20~30rpm。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤3)脱盐方法包括:将盐析后的藻蓝蛋白沉淀加入氯化铵溶液中溶解沉淀,过分子量为1×105~5×105的超滤膜浓缩除去磷酸盐和铵盐离子。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤3)中的干燥为喷雾干燥。
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