[发明专利]一种多功能磁性DNA纳米球及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 201710116597.X | 申请日： | 2017-02-28 |
| 公开（公告）号： | CN106754894B | 公开（公告）日： | 2019-07-02 |
| 发明（设计）人： | 郭英姝;王玉洁;李双;张书圣 | 申请（专利权）人： | 临沂大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N15/11;G01N21/64;C12Q1/686;A61K47/54;A61K31/704;A61K49/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 王志坤 |
| 地址： | 276000*** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 多功能 磁性 dna 纳米 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种多功能磁性DNA纳米球，其特征在于，所述多功能磁性DNA纳米球包括结合有磁珠的DNA纳米球，其制备方法如下：
(1)构建反应体系，进行DNA链的环化和连接，得到结合了磁珠的环状DNA；所述反应体系包括：磷酸化的线性DNA模板单链、DNA引物单链I、T4 DNA连接酶、D-PBS溶液和磁珠溶液，所述磷酸化的线性DNA模板单链的序列如SEQ ID NO.1所示，所述DNA引物单链I为多聚(T)DNA引物单链或修饰生物素分子的DNA引物单链，多聚(T)DNA引物单链的序列如SEQ IDNO.2所示，修饰生物素分子的DNA引物单链的序列如SEQ ID NO.3所示；
(2)将结合了磁珠的环状DNA与phi29 DNA聚合酶和dNTP溶液混合，进行滚环扩增反应，即得结合有磁珠的DNA纳米球。
2.根据权利要求1所述的多功能磁性DNA纳米球，其特征在于，步骤(1)中，所述反应体系中，磷酸化的线性DNA模板单链和DNA引物单链的浓度为80-120μM；T4 DNA连接酶的浓度为1800-2200U/μL。
3.根据权利要求2所述的多功能磁性DNA纳米球，其特征在于，步骤(1)中，所述反应体系中，磷酸化的线性DNA模板单链和DNA引物单链的浓度为100μM；T4 DNA连接酶的浓度为2000U/μL。
4.一种多功能磁性DNA纳米球，其特征在于，所述多功能磁性DNA纳米球包括含双硫键的结合有磁珠的DNA纳米球，其制备方法如下：
(1)构建反应体系，进行DNA链的环化和滚环扩增反应，得到滚环扩增产物；所述反应体系包括：磷酸化的线性DNA模板单链、DNA引物单链I、T4 DNA连接酶、D-PBS溶液、phi29 DNA聚合酶和dNTPs，所述磷酸化的线性DNA模板单链的序列如SEQ ID NO.1所示；所述DNA引物单链I为多聚(T)DNA引物单链或修饰生物素分子的DNA引物单链，修饰生物素分子的DNA引物单链的序列如SEQ ID NO.3所示，所述多聚(T)DNA引物单链的序列如SEQ ID NO.2所示；
(2)将链霉亲和素磁珠与DNA引物单链II混合反应，然后与滚环扩增产物反应形成含双硫键的结合磁珠的DNA纳米球，所述DNA引物单链II为修饰双硫键及生物素分子的DNA引物单链，其序列如SEQ ID NO.4所示。
5.权利要求1-4任一项所述的多功能磁性DNA纳米球在制备对CEM细胞的靶向给药系统中的应用。
6.权利要求4所述的多功能磁性DNA纳米球在制备检测细胞内巯基化合物的试剂中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于临沂大学，未经临沂大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201710116597.X/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：电洗脱仪
- 下一篇：提取原油总脱氧核糖核酸的方法及试剂盒
