[发明专利]烟草幼苗中土霉素含量的检测方法

权利要求书

1.烟草幼苗土霉素含量的检测方法，其特征是依次进行以下步骤：

1)、将新鲜烟草幼苗叶1g用蒸馏水洗净磨碎，然后用体积浓度为5％甲酸水溶液进行匀浆；

所述烟草幼苗叶与体积浓度为5％甲酸水溶液的重量比为1：1；

2)、称取匀浆液1.0g于带塞容器中，并向其中加入2.0毫升提取液；所述提取液由体积比为70：30的甲醇和超纯水组成；

将带塞容器密封后先进行漩涡振荡，然后超声处理，接着再高速离心，取上清液过滤，得滤液；

漩涡振荡为：于200±20r/min振荡频率下振荡2±0.5min；

超声处理为：于20KHz超声波下进行超声处理3.0±0.5min；

高速离心为于5000±500r/min离心5±1min；

3)、将步骤2)的滤液加入ODS C8固相萃取柱中进行吸附，先用2ml纯水洗脱，然后用2ml甲醇进行洗脱，收集全部甲醇洗脱液，干燥后用0.2ml流动相进行溶解，超高速离心后，取上清液作为待测液；

4)、将待测液用高效液相色谱-紫外色谱法检测；

检测条件为：5μm，250mm×4.6mm的安捷伦ODS C18column色谱柱，流动相的流速1.0mL/min，柱温40℃，紫外检测波长280nm；

得待测液的土霉素峰面积Y；

所述步骤3)和步骤4)的流动相均为乙腈-0.01M甲酸水溶液＝13：87的体积比；

5)、按照土霉素标准曲线方程Y＝15581X+201.56，获得待测液的土霉素质量浓度X，该X的单位为μg/mL；

最后经换算获得新鲜烟草幼苗叶中的土霉素含量。

2.根据权利要求1所述的烟草幼苗土霉素含量的检测方法，其特征是：

所述步骤3)中：

所述干燥为：于40℃水浴中氮气流挥干；

所述超高速离心为：于18000±1000r/min高速离心5±1min。

3.根据权利要求2所述的烟草幼苗土霉素含量的检测方法，其特征是：

所述步骤2)中：过滤为经有机滤头过滤，有机滤头的孔径为0.22μm。