[发明专利]一种京尼平的制备方法

权利要求书

1.一种京尼平的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

步骤1，将40mg纳米SiO₂颗粒超声波分散在4mL无水乙醇中，加入80μL3-氨丙基三乙氧基硅烷，充分混匀，在30℃、120r/min摇床中反应24h，即完成纳米SiO₂颗粒的氨基化过程，得到Nano-SiO₂@NH₂；反应结束后，将悬浊液在8000×g下离心3min，弃上清取沉淀，并将沉淀用蒸馏水洗涤5次；沉淀再用4mL10mM、pH 7.3的磷酸缓冲液充分重悬后，加入1mL 25％的戊二醛溶液，在30℃、120r/min摇床中反应2h，即完成氨基化的载体与戊二醛的交联反应，得到Nano-SiO₂@NH₂@CHO；反应结束后，将悬浊液在8000×g下离心3min，弃上清取沉淀，同样将沉淀用蒸馏水洗涤5次后待用；将Nano-SiO₂@NH₂@CHO与过量的β-葡萄糖苷酶酶液混合，在4℃下偶联24h；反应结束后，将悬浊液在8000×g下离心3min，收集上清和纳米固定化酶，将纳米固定化酶用蒸馏水洗涤5次后待用；

步骤2，将栀子苷溶于pH为6.0的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液中，加入纳米固定化酶，在50℃下反应1-3h，反应结束后离心，分离上清液得到京尼平，分离得到的纳米固定化酶重复使用。