[发明专利]一种适配体修饰的携氧载药多功能脂质体复合物

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种可逆转肿瘤耐药的适配体修饰的携氧载药多功能脂质体复合物。

背景技术

癌症是严重危害人类健康的重大疾病之一，近年来发病率呈显著上升趋势。肺癌是所有癌症中存活率最低的癌症之一。肺癌分为小细胞肺癌（SCLC）和非小细胞肺癌（NSCLC）。非小细胞肺癌是肺癌中的常见类型，大约占所有确诊肺癌患者中的80~85%。厄洛替尼（erlotinib）是一类选择性表皮生长因子受体（EGFR）酪氨酸激酶抑制剂（TKI），是特异性较高的抗肿瘤靶向治疗药物。尽管厄洛替尼在NSCLC的治疗中取得了一定的疗效，但肿瘤细胞对其产生耐药性阻碍了其在临床上的有效应用。

研究表明，肺癌细胞对分子靶向药物产生耐药性的原因有很多。缺氧是致使肺癌细胞对厄洛替尼的敏感性降低的原因之一。缺氧是非小细胞肺癌的主要微环境特征之一，在肿瘤的发生、发展中起重要作用。局部微环境的缺氧可促进肿瘤细胞的增殖、浸润和转移、凋亡等恶性生物学行为的发生。因此，如何逆转缺氧诱导的肿瘤耐药性已成为当今医学界研究的热点。

目前，临床上已有应用的携氧体分为两类：全氟碳化物（PFCs）和血红蛋白携氧载体（HBOC）。PFCs相对HBOC携氧能力更强，具有的化学氧超过患者自身红细胞的供氧能力。而且，PFC颗粒微小，可经毛细血管渗入到红细胞不能达到的肿瘤缺氧区，使肿瘤组织的P(O₂)显著提高。因此，利用PFCs供氧可提高化疗的疗效，明显延缓肿瘤的生长速度。PFCs种类很多，相比较而言，全氟溴辛烷（PFOB）具有载氧量高、易降解、已用于临床试验等优势。因此，PFOB是理想的、可靠的、安全的携氧载体。

由于PFOB和厄洛替尼均不溶于水，需要选择能够装载难溶性药物的纳米材料作为载体。脂质体是由卵磷脂、胆固醇按一定比例制备而成的，具有与生物体细胞相类似的磷脂双分子层结构，因此具有很好的生物相容性。但脂质体在体内酶以及化学环境下，容易降解而破坏。目前，已有很多学者利用聚乙二醇（PEG）修饰脂质体，以提高脂质体的稳定性。然而，PEG化容易阻碍细胞摄取，降低了药物输送效率。壳聚糖（chitosan，简写Cs）是由自然界广泛存在的几丁质经过脱乙酰作用得到的疏水性聚合物，其生物相容性好，在生物体内可降解，并且已用于临床。因此，利用壳聚糖来修饰脂质体，可以有效的提高脂质体的稳定性。

近年来，靶向纳米药物在肿瘤治疗方面具有广阔的应用前景。纳米药物的主动靶向是通过偶联一定的配体，如核酸适配体、抗体、多肽等，以提高药物在肿瘤中的浓度。核酸适配体是一小段经体外筛选得到的寡核苷酸序列，与传统抗体相比，它具有体积小、稳定、生物相容性高、能与相应的配体进行高亲和力和强特异性的结合等优势。EGFR在NSCLC中高表达，并且与肿瘤细胞的增殖、侵袭、损伤修复、血管生成密切相关。因此，EGFR可作为肺癌治疗的靶蛋白，将纳米材料用识别EGFR的适配体修饰可特异性靶向EGFR高表达的肺癌细胞。

基于以上背景，本发明构建了一种由壳聚糖修饰的脂质体以及固定在脂质体中具有特异性EGFR识别能力的核酸适配体组成的，并包载有分子靶向药物厄洛替尼和携氧体PFOB的携氧载药多功能脂质体复合物，其能特异性地靶向肺癌细胞，并能释放氧气调节肿瘤缺氧微环境，以协同改善分子靶向药物厄洛替尼的耐药性，有效抑制肿瘤的生长，达到治疗肺癌的效果。

发明内容

本发明目的在于提供一种适配体修饰的携氧载药多功能脂质体复合物，该复合物具有靶向能力，可包载对肿瘤细胞有杀伤作用的抗癌药物，并同时通过携带的携氧体负载氧气以改善肿瘤缺氧的微环境，从而逆转肿瘤细胞缺氧所诱导产生的耐药性。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种适配体修饰的携氧载药多功能脂质体复合物，其由抗癌药物、携氧体和纳米载体构成，具有一体化靶向输送药物和供氧功能，能够逆转肿瘤细胞耐药性；

所述纳米载体是由卵磷脂、胆固醇、壳聚糖、靶向EGFR的核酸适配体制成。

所述脂质体复合物的粒径均一，尺寸为80~250 nm。

纳米载体中所用卵磷脂与胆固醇的质量比为1:1~5:1；壳聚糖用量占所得纳米载体重量的15%~50%。

脂质体复合物中抗癌药物量为纳米载体重量的1%~10%；所述抗癌药物包括分子靶向药物厄洛替尼。

所述携氧体为全氟溴辛烷。

所述多功能脂质体复合物的制备方法包括以下步骤：