[发明专利]海藻多糖提取物的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于海洋活性物质提取技术领域，具体涉及一种海藻多糖提取物的制备方法。

背景技术

海洋面积辽阔，海洋藻类植物来源丰富，海藻多糖正逐步成为生物多糖的主要来源之一。由于海藻生存环境特异，海藻多糖具有某些独特的生理活性，如：海带多糖可降低脾脏内过氧化物含量，增加超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)的活性，达到抗肿瘤的目的；紫菜多糖、硫酸甘糖酯等具有抗血栓、改善微循环等作用；海带多糖、紫菜多糖等对机体细胞有保护功能。越来越多的研究结果已经显示出海藻多糖具有广阔的开发应用前景，褐藻多糖是其中的重要组成部份，它包括褐藻糖胶(Fucoidan)、褐藻胶(Algin)与褐藻淀粉(Laminaran)。褐藻糖胶是水溶性多糖，存在于细胞间组织中，为组成相似的杂多糖混合物，其主要成分为L-岩藻糖-4-硫酸酯，还伴随少量的半乳糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖、糖醛酸等，褐藻糖胶通常与蛋白质结合，分级纯化较困难(海藻化学.纪明侯.北京：科学出版社.1997.p12-17)，褐藻糖胶的衍生物在抗艾滋病毒、治疗肾衰竭、降血糖等方面已逐渐显示出了巨大潜力。

海藻多糖提取过程中的浸提及沉淀是两个最关键的步骤。浸提是将海藻用机械或化学方法破碎后，在常温或加热条件下，用碱性、中性或酸性溶液浸泡，但一般存在浸提时间较长、浸提回收率较低等问题。在浸提之前可以采取一些预处理及净化方法减少浸提液中其它杂质含量，如用Sevage法、高浓度醇类及甲醛溶液等预处理除去蛋白质，或者采用酸或碱处理藻体，但预处理往往会造成多糖损失、降低多糖回收率。

得到的含有海藻多糖浸提液后，一般采用减压浓缩提取液的办法减少后续的处理体积，或用透析的方法浓缩提取液。也有采用常压下水浴蒸发浓缩提取液和压滤的方法(周志刚等，极大螺旋藻多糖的分离、纯化及其抗氧化的特性，植物学报，1997，39(1)：77-81；纪明侯等，用13C-NMR光谱法研究几种红藻含硫半聚糖的结构特征，海洋与湖沼，1996，27(3)：330-335)。

从浸提液中提取分离海洋生物活性多糖目前几乎都是采用沉淀法，如乙醇沉淀、氯化十六烷基吡啶(CPC)或溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)沉淀等。而海藻多糖的提取分离现在几乎都是乙醇沉淀法，如浒苔多糖、螺旋藻多糖、螺旋藻粘多糖、褐藻多糖硫酸酯、蜈蚣藻卡拉胶等均采用乙醇沉淀法提取。比如，B.Ray等采用水煮法从石莼(Ulva rigida)中连续提取、乙醇沉淀提取分离细胞壁多糖(1995)；张尔贤等经水煮后从鼠尾藻和铜藻中用乙醇沉淀法提取分离海藻多糖(1995)；周志刚等用蒸馏水水煮-乙醇沉淀法提取分离了培养的三种(极大、钝顶和盐泽)螺旋藻的胞外、胞内多糖(1997)；螺旋藻多糖的一般提取分离也是将海藻经80℃热水提取后，用95％乙醇沉淀分离(徐惠等：中国生化药物杂志，1997，18，72；曾和平等：药物学报，1995，330，858；左绍远等：药物生物技术，1996，3，158)。

乙醇沉淀法虽然易于大规模生产，但它存在如下问题：

1、一般只能得到多糖含量较低的粗产品(＜50％)，由于产品含大量变性蛋白质等杂质，增加了后续的乙醇重沉淀、离子交换、层析等纯化过程的难度；

2、每公斤粗多糖需消耗工业乙醇50-60公斤，而总回收率一般仅为10-30％，造成产品成本高；

3、乙醇回收系统投资大、流程较复杂、能耗高；而且整个提取过程在工程放大时不易实现连续化、自动化。

目前尽管进行了一些其它方法的研究，但仍是沉淀法，如氯化十六烷基吡啶(CPC)沉淀、溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)沉淀、氢氧化铝与氢氧化铅络合物沉淀等，同样存在与乙醇沉淀法相同的问题。

电场絮凝用于生物活性物质的回收处理是一个引人注目的话题。Kumay等(Kumay H D et.al.Electrical flocculation ofthe unicellular green Algachlorella Vulgaris.Aquatic Botany.1981，11：187-195)研究电场絮凝单细胞绿藻时发现：电流通过悬浮液时；绿藻凝聚上浮；3V/cm电场，30分钟，pH值＝7.0时，可将近90％绿藻从水中分离；赵兵等人(ZL90100012.4，1990)利用电场絮凝方法提取了α-淀粉酶、碱性蛋白酶和糖化酶。但迄今为止，尚无絮凝提取海藻多糖的工艺。

发明内容

为了解决现有海藻多糖提取存在的回收率低，以及活性低的问题，本发明提出一种海藻多糖提取物的制备方法，该制备方法便于工业化生产。