[发明专利]一种可逆纳米卟啉荧光传感器识别定量手性氨基酸方法有效
申请号: | 201710106851.8 | 申请日: | 2017-02-27 |
公开(公告)号: | CN106706591B | 公开(公告)日: | 2019-05-10 |
发明(设计)人: | 付海燕;胡鸥;杨天鸣;郭晓明;范尧;佘远斌 | 申请(专利权)人: | 中南民族大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 北京思海天达知识产权代理有限公司 11203 | 代理人: | 张立改 |
地址: | 430074 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 可逆 纳米 卟啉 荧光 传感器 识别 定量 手性 氨基酸 方法 | ||
1.一种可逆纳米卟啉荧光传感器识别定量手性氨基酸方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将二氯化镉和N-乙酰-L-半胱氨酸溶于超纯水中,在常温、常压下搅拌15分钟后用氢氧化钠溶液将溶液pH调为8.00,然后充氮气冰浴搅拌20分钟;加入亚碲酸钠,搅拌15分钟;再加入硼氢化钠,搅拌15分钟;最后将此溶液放入反应釜中,在200℃的烘箱中反应50分钟,得到发射波长为641nm的红光CdTe量子点荧光探针;
(2)将四-(4-吡啶基)锌卟啉溶于四氢呋喃溶液中,向十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)水溶液中加入四-(4-吡啶基)锌卟啉四氢呋喃溶液,常温、常压搅拌10分钟,溶液由浑浊变澄清,反应停止,得到四-(4-吡啶基)锌卟啉纳米球自组装溶液;
(3)将四-(4-吡啶基)锌卟啉纳米球自组装溶液加入到CdTe量子点荧光探针中,再加入pH=4.02的Tris-HCl缓冲溶液,四-(4-吡啶基)锌卟啉纳米球自组装溶液通过电子转移和荧光共振能量转移作用,猝灭量子点荧光,通过特异性结合得到的复合物,提供量子点一个“Turn-off”的状态;
(4)将不同浓度范围的D型和L型氨基酸加入步骤(3)得到的量子点荧光适当猝灭的复合物中,量子点荧光恢复,D型和L型氨基酸致使量子点荧光恢复的现象产生明显的差异,实现了在可逆纳米卟啉荧光传感模式下手性氨基酸的识别与定量;从而得到可逆开-关-开纳米卟啉荧光传感器;
或直接将步骤(3)和(4)合并:将不同浓度范围的D型和L型氨基酸、步骤(2)中合成的四-(4-吡啶基)锌卟啉自组装溶液、pH=4.02的Tris-HCl缓冲溶液混合,静置5分钟;再加入步骤(1)合成的CdTe量子点,在540-720nm处进行荧光光谱测定,测得其5分钟后的光谱。
2.按照权利要求1所述的一种可逆纳米卟啉荧光传感器识别定量手性氨基酸方法,其特征在于,二氯化镉、N-乙酰-L-半胱氨酸、亚碲酸钠的物质的量的比为1.0:(1.2~1.5):0.2。
3.按照权利要求1所述的一种可逆纳米卟啉荧光传感器识别定量手性氨基酸方法,其特征在于,步骤(2)中四-(4-吡啶基)锌卟啉与十六烷基三甲基溴化铵在混合溶液中物质的量比为1:1.3~1.5。
4.按照权利要求1所述的一种可逆纳米卟啉荧光传感器识别定量手性氨基酸方法,其特征在于,步骤(3)四-(4-吡啶基)锌卟啉纳米球中四-(4-吡啶基)锌卟啉与CdTe量子点溶液的物质的量比为40~42:1。
5.按照权利要求1所述的一种可逆纳米卟啉荧光传感器识别定量手性氨基酸方法,其特征在于,步骤(3)混合溶液中四-(4-吡啶基)锌卟啉纳米球的浓度、CdTe量子点浓度分别为8.0×10-9-1.28×10-7mol/L、5.8×10-9mol/L。
6.按照权利要求1所述的一种可逆纳米卟啉荧光传感器识别定量手性氨基酸方法,其特征在于,可逆纳米卟啉荧光传感器定量识别的D型和L型氨基酸分别为D/L-脯氨酸,D/L-赖氨酸,D/L-丝氨酸。
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