[发明专利]水解酶CwlC在芽胞杆菌母细胞裂解中的应用

说明书

本发明涉及“水解酶CwlC在芽胞杆菌母细胞裂解中的应用”。本发明鉴定了一个新的参与母细胞裂解的苏云金芽胞杆菌(B. thuringiensis)中cwlC基因，cwlC基因缺失可完全阻断母细胞裂解，并且不影响芽胞形成和Cry1Ac蛋白的产量。同时发现GFP标记的CwlC蛋白可与细胞壁紧密结合。更重要的是，CwlC可水解对数生长期有活性的苏云金芽胞杆菌和枯草芽胞杆菌(Bacillus cereus)细胞的细胞壁。本发明表明CwlC不仅是芽胞期苏云金芽胞杆菌母细胞裂解的关键，对于构建高效用于农业生产的苏云金芽胞杆菌工程菌有很大意义，而且CwlC在生物医药和食品生产方面也有很大的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是水解酶CwlC在芽胞杆菌母细胞裂解中的应用。

背景技术

芽胞杆菌(Bacillus spp.)是一种产芽胞革兰氏阳性菌，当受到外部环境的胁迫时会在母细胞中产生休眠的芽胞。在芽胞期晚期，母细胞自溶并伴随着成熟芽胞的释放是细菌细胞程序性死亡的标志(programmed cell death,简称PCD)(LewisK.2000.Programmed death in bacteria.Microbiol Mol Biol Rev64:503–514.)。因此，理解母细胞中信号转导通路控制的PCD是十分重要的，而细胞壁水解酶在这过程中起着关键的作用(Lewis K.2000.Programmed death in bacteria.Microbiol Mol Biol Rev64:503–514.)。细菌肽聚糖水解酶包括一个大的和高度多样化的酶族群，它们可剪切高分子肽聚糖或可溶性片段的化学键(Shockman GD,Daneo-Moore L,Kariyama R,MassiddaO.1996.Bacterial walls,peptidoglycan hydrolases,autolysins andautolysis.Microb Drug Resist2:95–98.)。因此，参与母细胞裂解的水解酶研究为细菌程序性死亡的探究提供了分子基础。