[发明专利]一种同时检测血清/血浆中多种维生素的方法和试剂盒

说明书

本发明公开了一种可以同时检测血清/血浆中多种维生素的方法，包括如下步骤：(1)将待测血清或待测血浆与去蛋白液混匀后离心，取上清液；(2)将步骤(1)所得上清液和内标混合液混匀后采用串联质谱法进行检测，通过比较维生素和维生素的内标的离子强度来得出待测血清或待测血浆中维生素的含量；另外，本发明还公开了一种同时检测血清/血浆中多种维生素的试剂盒，其包括内标混合液、去蛋白液、流动相和探针洗液；本发明的方法可从血清/血浆将多种水溶性和脂溶性维生素提取出来，利用串联质谱仪在2～3min内对1个标本中十余种维生素同时进行定量，检测周期显著缩短，并且维生素的检测结果有更高的精密度和准确度。

技术领域

本发明涉及维生素检测技术，尤其是一种可以同时检测血清/血浆中多种维生素的方法和试剂盒。

背景技术

维生素(vitamin)是人和动物为维持正常的生理功能而必需从食物中获得的一类有机物质，在人体生长、代谢过程中发挥着重要的作用。机体缺乏维生素将引起代谢障碍，并发生各种疾病,这类疾病统称为维生素缺乏症。目前，根据溶解性可将维生素分为脂溶性维生素和水溶性维生素两大类，水溶性维生素包括B族维生素、维生素C等；脂溶性维生素包括维生素A、D、E、K等。

脂溶性维生素中，维生素A是视网膜中感光细胞的感光物质的主要成分，维生素A缺乏会导致干眼症，对于成人，维生素A缺乏时易导致夜盲症；维生素D(VitaminD，VitD)对人类健康特别是儿童健康具有重要意义,VitD缺乏性佝偻病是我国儿童重点防治的四病之一，临床发现VitD缺乏性佝偻病除骨骼病变外,同时可影响神经、肌肉、造血及免疫等组织器官的功能；维生素E有抗氧化的作用，能防止不饱和脂肪酸的自身氧化，因而有保护生物膜的功能，使生物膜中的不饱和脂肪酰不致于因氧化变硬，使膜遭到破坏；维生素K对正常的血液凝结有重要作用,缺乏维生素K会出现血凝缓慢，甚至可导致大出血。

水溶性维生素主要包括B族维生素和维生素C等，比如B₁(硫胺素)、B₂(核黄素)、B₅(泛酸)、B₆(吡哆醛等)、B₁₂(钴胺素)、烟酸(尼可酸)、生物素，叶酸等；B族维生素在生物体内通过构成辅酶而影响物质代谢，如在细胞呼吸中起重要作用。

维生素最早期的检测用于一般的添加食品，如婴儿配方食品、谷类产品和果汁等。European Directive 2002/46 EC制定了一系列关于食品添加剂标识及检测添加过维生素的食品中标注的维生素含量的法规。我国国家标准GB5413～2010对婴幼儿配方食品与乳品中维生素含量也有明确的规定，标准中涉及的方法有微生物法及高效液相色谱法。关于维生素的检测，传统方法为微生物法，其灵敏度高、结果准确，但该方法有许多局限性：整个实验周期长，批次检测结果重复性差，检测结果误差较大，并且每次只能进行单一维生素种类的检测；而最近，液相串联质谱技术的发展使得维生素的检测进入了一个全新的领域，近几年来串联质谱技术在国内医疗市场的占有率愈来愈高，使得串联质谱在临床疾病的诊断中得到普及。

发明内容

基于此，本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种可以同时检测血清/血浆中多种维生素的方法和试剂盒，该方法具有更高的精密度和准确度，检测效率显著提升。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种同时检测血清/血浆中多种维生素的方法，包括如下步骤：

(1)将待测血清或待测血浆与去蛋白液混匀后离心，取上清液；

(2)将步骤(1)所得上清液和内标混合液混匀后采用串联质谱法进行检测，通过比较维生素和维生素的内标的离子强度来得出待测血清或待测血浆中维生素的含量。应当说明的是，本发明中的串联质谱法采用液相色谱串联质谱联用仪。