[发明专利]一种镉离子直接竞争ELISA试剂盒及其应用

说明书

本发明提供了一种基于直接竞争酶联免疫法镉离子检测试剂盒，包括：包被有羊抗鼠IgG二抗的检测板，所述检测板真空密封包装；所述羊抗鼠IgG二抗的包被浓度为50～200μg/mL；质量浓度为20～50μg/mL的酶标Cd‑ITCBE鳌合物半抗原；质量浓度为10～20μg/mL的抗镉离子单克隆抗体溶液；所述抗镉离子单克隆抗体溶液由Cd‑ITCBE‑cBSA免疫原免疫Balb/C小鼠制备而来；1.0～3.0mol/L的终止液；样品稀释液；底物显色液；洗涤液；镉离子标准品溶液；质量浓度为10～20mg/mL的EDTA处理液。本发明提供试剂盒具有灵敏度高、特异性强的特点，同时具有检测时间短的优点。

技术领域

本发明属于环境检测技术领域，具体涉及一种镉离子直接竞争ELISA试剂盒及其应用。

背景技术

重金属镉(cadmium，Cd)由于其良好的性能在电镀、电池、汽车、航空、颜料、油漆、印刷、塑料等行业中发挥着重要的作用，但也已成为环境污染的公害之一。Cd主要以离子形式(Cd²⁺)存在，可通过食物链富集作用危害人类健康，对人体具有肾脏、骨骼、肺脏、心血管等毒性作用和致癌、致畸、致突变等危害作用。联合国粮农组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)将Cd²⁺列为第三位优先研究的食品污染源，联合国环境署(UNEP)、FAO和WHO共同制定的食品污染物监测和评价计划中将Cd²⁺含量作为必测项目之一，美国毒物和疾病注册处(ATSDR)把Cd²⁺列为第六位危害人体健康的有毒物质。2005年我国制定了食品中Cd²⁺最大残留限量标准(MRL)(GB2762-2005)，粮食为0.1～0.2mg/kg，肉类为0.1mg/kg，蛋类为0.05mg/kg，蔬菜类为0.05～0.2mg/kg，水果类为0.05mg/kg。

目前动物性食品及环境水样中Cd²⁺污染的主要检测方法包括传统的理化检验和免疫学检验两种类型的方法。理化检验包括紫外分光光度法(UV)、电化学分析法、原子吸收光谱法(AAS)、电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)、电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)、氢化物发生-原子荧光光谱法(Cd-AFS)和中子活化分析法(NAA)等，它们是目前Cd²⁺污染检测的主要方法，灵敏度高，结果准确，但由于需要昂贵的仪器设备、熟练的专业人员、烦琐费时、周期长、费用高、不能现场操作、样品筛检量小等缺陷，其应用受到了限制。免疫学检验方法是以抗原抗体分子的特异性、可逆性反应为基础的分析技术，包括荧光偏振免疫测定法(FPIA)、酶联免疫吸附测定法(ELISA)、KinExA免疫测定法(KIA)、胶体金免疫层析试验测定法(GICA)和微悬臂梁免疫传感器(MIS)等，由于抗原抗体的结合具有高度的选择性和敏感性，这一技术具有简便、快速、敏感、特异、经济、筛检量大等优势，代表着重金属离子检测的发展方向。目前，国内外重金属镉离子污染免疫检测技术研究非常活跃，其中公告号为CN104155424A的专利公开了一种镉离子阻断ELISA试剂盒，检测范围为5.0～512μg/L，并且检测时间较长。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种基于直接竞争酶联免疫法检测镉离子试剂盒及其应用，使所述试剂盒具有检测时间短的优点，同时具有灵敏度高、特异性强的特点。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种基于直接竞争酶联免疫法镉离子检测试剂盒，包括：

(1)包被有羊抗鼠IgG二抗的检测板，所述检测板真空密封包装；所述羊抗鼠IgG二抗的包被浓度为50～200μg/mL；

(2)质量浓度为20～50μg/mL的酶标Cd-ITCBE鳌合物半抗原溶液；

(3)质量浓度为10～20μg/mL的抗镉离子单克隆抗体溶液；所述抗镉离子单克隆抗体溶液由Cd-ITCBE-cBSA免疫原免疫Balb/C小鼠制备而来；