[发明专利]一种水晶心脏流出道标本的制作方法

说明书

技术领域

本发明属于动物组织标本制作技术领域，具体涉及一种水晶心脏流出道标本的制作方法。

背景技术

动物组织的标本在教学及科研领域中发挥着重要作用。目前国内市场上制作出来的动物标本大多数是采用福尔马林固定的普通标本，传统心脏的标本都是体积比较大，或者是展示心肌的分层，或者是展示各个腔室，而心脏相关的流出道展示的不够完整，并且整个标本浸泡在福尔马林溶液内，时间久了会变黑，学生看了除了恶心就是有讨厌学习的感觉。制作出来心脏流出道，其外观美观度差，且无法清晰的观察到心脏流出道发育的情况，不易于对于各种心脏发育畸形进行研究和教学。尤其是在胚胎时期心脏还是心管时，此时的心管的学习仅仅通过教科书上的模型，几乎连教学老师们也没有见过真实的心管是啥样子的，很不利于教学和科研。

发明内容

为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种水晶心脏流出道标本的制作方法。该制作方法中采用一种全新的透明方法，不仅制作出的水晶心脏流出道在质量上优越，能更清楚地观察到流出道的构型，便于对各种心脏发育畸形的判定，而且制作周期短。

为实现上述发明目的，本发明是通过以下技术方案来实现的：

一种水晶心脏流出道标本的制作方法，包括如下制备步骤：

(1)取材：获取动物标本；

(2)固定：依次采用体积百分比浓度为30～50％的乙醇、75～100％的甲醇和95～100％的乙醇处理步骤(1)中获得的动物标本；其中，丙酮的作用是进一步更好的脱脂；第二次使用乙醇其作用主要是为了洗脱丙酮，进一步脱水，为后续实验做准备。固定过程中，选用如上所述的体积百分比浓度，一方面，该区间浓度内不会剧烈使组织缩水，而使动物形态变化；另一方面，其他浓度不能最佳的溶解脂类。

(3)透明化处理：先用体积百分比浓度为1～5％的KOH洗脱步骤(2)处理后的标本，再依次采用30～50％的丙三醇、60～75％的丙三醇和90～100％的丙三醇对的所述动物标本进行梯度透明化处理。梯度透明处理能有效防止组织皱缩变形，失去自然形态。透明化处理不同动物组织处理天数不一，依据是动物组织下沉到丙三醇的底部，并且透明度增加，

(4)显微处理：在显微镜下，对步骤(3)透明化处理后的心脏标本除去相应部位的软组织，得到所述水晶心脏流出道标本。

较佳地，步骤(2)中，所述95～100％的乙醇处理前先用75～100％的丙酮对标本进行处理。

较佳地，所述步骤(3)中，所述30～50％的丙三醇处理前，先用1～5％的KOH从低浓度到高浓度逐渐洗脱步骤(1)所述标本。

较佳地，所述用1～5％的KOH从低浓度到高浓度逐渐洗脱步骤(1)所述标本之后，先用过氧化氢对标本进行处理，后再用30～50％的丙三醇处理。

较佳地，所述步骤(2)具体为：将步骤(1)中所得动物标本先入30～50％的乙醇中置于摇床上固定10～15小时；再放入75～100％的甲醇中置于摇床上10～15小时；再放入75～100％的丙酮中置于摇床上10～15小时；最后将动物标本放入95～100％的乙醇中置于摇床上10～15小时。不同动物组织的固定处理时间不同，其他动物的组织是根据皮肤有无毛发、皮下脂肪组织多少以及皮肤的致密程度来决定的，不同动物处理方式是有区别的。

较佳地，所述摇床转述为50～70转/分钟。

用所述方法制作的水晶心脏流出道标本的图片拍摄方法，拍摄时候，用目标增强法进行拍照；其具体是在拍摄时候，将标本放置的透明玻板，将传统的，将光源放置在透明玻板底部，改为将光源设置在于标本同两侧边。充分透明后体式显微镜或者单反相机拍照，即可保存清晰的心脏及其各流出道的清晰结构。

本发明采用30～50％乙醇、75～100％甲醇、75～100％丙酮和95～100％乙醇固定动物标本；充分固定后，1～5％KOH从低浓度到高浓度逐渐洗脱标本，使其软化，再采用不同梯度的丙三醇对其进行逐渐透明化处理；充分透明后体式显微镜或者单反相机拍照，不仅制作周期缩短为15～30天，而且可保存清晰的心脏及其各流出道的清晰结构。