[发明专利]一种快速定量评价不同抗菌药物作用效果的方法有效
申请号: | 201710089193.6 | 申请日: | 2017-02-20 |
公开(公告)号: | CN108459001B | 公开(公告)日: | 2020-10-27 |
发明(设计)人: | 徐健;陶一帆;王允;黄适;凌均棨 | 申请(专利权)人: | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 |
主分类号: | G01N21/65 | 分类号: | G01N21/65;G01N33/50 |
代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人: | 李颖;周秀梅 |
地址: | 266101 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 定量 评价 不同 抗菌 药物 作用 效果 方法 | ||
1.一种快速定量评价不同抗菌药物作用效果的方法,其特征在于:利用重水标记和待检测药物培养抗病菌,再通过拉曼光谱检测培养中单个细胞在一段时间下C-D峰1800-2500cm-1变化,而后通过光谱C-D峰1800-2500cm-1变化计算获得单个细胞C-D-ratio,再由C-D-ratio获得不同时间点的ΔC-D-ratio,进而获得待检测药物最小抑制代谢浓度MIC-MA,即定量的判别待检测药物敏感性。
2.按权利要求1所述的快速定量评价不同抗菌药物作用效果的方法,其特征在于:所述C-D-ratio=C-D/(C-D+C-H),其中,C-D为C-D峰1800-2500cm-1面积,C-H为C-H峰2600-3300cm-1面积;
所述ΔC-D-ratio经每个时间点的C-D-ratio与0h的C-D-ratio的平均值相减;
所述最小抑制代谢浓度MIC-MA为在药物暴露数小时后,细胞ΔC-D-ratio的中位数低于0时的最小药物浓度。
3.按权利要求1所述的快速定量评价不同抗菌药物作用效果的方法,其特征在于:分别获取培养周期内不同时间点培养液单细胞的单细胞拉曼图谱,利用细胞在不同待测药物和不同待测药物浓度下的代谢活性不同而产生含有不同高度C-D峰的拉曼光谱,从而进行判别待检测药物敏感性。
4.按权利要求1或3所述的快速定量评价不同抗菌药物作用效果的方法,其特征在于:将培养至平台期抗病菌培养至含有重水标记和不同浓度下的待检测药物的培养基内,分别取培养周期内不同时间点的培养液细胞并采集该单细胞拉曼光谱,其中,采集单细胞拉曼光谱在能量为1-100mW的激光下,采集拉曼光谱的时间为0.01-100s。
5.按权利要求4所述的快速定量评价不同抗菌药物作用效果的方法,其特征在于:所述不同浓度下的待检测药物为从低于最小抑制浓度到高于最小抑制浓度的浓度之内的梯度。
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