[发明专利]一种防己茯苓汤组合物的质量控制方法

权利要求书

1.防己茯苓汤组合物的检测方法，其特征在于，包括采用高效液相色谱法建立防己茯苓汤组合物指纹图谱，色谱条件为：

色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；

流速：0.8ml/min～1.2ml/min；柱温：20℃～35℃；

检测仪器采用紫外检测器，指纹图谱的检测波长237nm；

理论塔板数以甘草酸峰计算不低于5000；

参照物溶液为甘草酸溶液；

以乙腈为流动相A，以0.2％磷酸+0.2％三乙胺溶液为流动相B，按如下顺序进行梯度洗脱：

还包括采用薄层色谱法鉴别防己茯苓汤组合物中的防己、甘草、黄芪、桂枝，鉴别方法如下：

(1)鉴别防己：取防己茯苓汤组合物2g～4g研细，加氨试液30ml～60ml，超声10min～30min，滤过，滤液加60ml～120ml水饱和正丁醇萃取，分取正丁醇层，减压蒸干，以甲醇1ml～5ml溶解，滤过，即得供试品溶液；

取防己对照药材0.2g～1g研细，加氨试液30ml～60ml，超声10min～30min，滤过，滤液加60ml～120ml水饱和正丁醇萃取，分取正丁醇层，减压蒸干，以甲醇1ml～5ml溶解，滤过，即得防己对照药材溶液；

取粉防己碱对照品、防己诺林碱对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg～2mg的混合溶液，作为对照品溶液；

鉴别方法：吸取供试品溶液，防己对照药材溶液，以及对照品溶液各4μl～8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-丙酮-甲醇-5％浓氨试液为展开剂，于湿度低于70％环境下展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液，其中，所述二氯甲烷-丙酮-甲醇-5％浓氨试液的体积比为3～12：0.5～2：0.5～2：0.05～0.2；

(2)鉴别甘草、黄芪：取防己茯苓汤组合物研细，称取1g～5g，加甲醇25ml～75ml超声20min～40min，滤过，滤液减压蒸干，残渣先后加氨试液、水并超声助溶，再通过内径为1.5cm柱高为15cm的D101型大孔吸附树脂柱，先后以水，30％～50％乙醇，70％～90％乙醇洗脱，收集70％～90％乙醇洗脱的洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml-5ml使溶解，作为供试品溶液；

取甘草对照药材0.2g～0.8g、黄芪对照药材1g～4g，研细，分别加甲醇超声，滤过，滤液减压蒸干，残渣先后加氨试液、水并超声助溶，再通过D101型大孔吸附树脂柱，先后以水，30％～50％乙醇，70％～90％乙醇洗脱，收集70％～90％乙醇洗脱的洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml-5ml使溶解，分别制得甘草对照药材溶液、黄芪对照药材溶液；

取黄芪甲苷、甘草苷、甘草酸铵对照品适量，加甲醇制成每1ml各含0.3mg～0.8mg的混合溶液，作为对照品溶液；

鉴别方法：吸取供试品溶液、甘草对照药材溶液、黄芪对照药材溶液及对照品溶液各5μl～9μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，使呈条带状；以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm下检视，再喷以5％～10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置于365nm的紫外光灯下检视，其中，所述乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水的体积比为7.5～30：0.5～2：0.5～2：1～4；

(3)桂枝鉴别：取防己茯苓汤组合物研细，称取1g～5g，加乙醇10ml～30ml超声20min～50min，滤过，作为供试品溶液；

取桂枝对照药材0.2g～1g研细，加乙醇10ml～30ml超声20min～50min，滤过，制得对照药材溶液；

取肉桂酸对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg～0.5mg的溶液，作为对照品溶液；

鉴别方法：分别吸取供试品溶液、对照药材溶液以及对照品溶液5μl～12μl，分别点于同硅胶GF254薄层板上；以环己烷-乙酸乙酯-冰乙酸为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm下检视，其中，所述环己烷-乙酸乙酯-冰乙酸的体积比为2～8：0.5～2：0.025～0.1。