[发明专利]GINS2基因或蛋白的抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用

说明书

本发明涉及GINS2基因或蛋白的抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明设计了针对人GINS2基因的小分子干扰RNA序列，RNA干扰载体和RNA干扰慢病毒，进一步检测了GINS2基因的沉默效率、GINS2‑siRNA慢病毒对肿瘤细胞增殖能力和凋亡水平的影响，结果显示采用RNAi方法下调人GINS2基因的表达后可有效抑制肿瘤细胞的增殖和生长并促进其凋亡，表明GINS2基因是原癌基因，可作为肿瘤治疗的靶点，通过RNAi方式沉默GINS2基因的表达可作为抑制肿瘤发展的有效手段，本发明构建的siRNA、RNA干扰载体和RNA干扰慢病毒可用于制备高效的抗肿瘤药物。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体地说，涉及GINS2基因或蛋白的抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

随着人类生活习惯和行为模式的改变，以及农工业发展过程带来的环境污染和人口老龄化等原因，恶性肿瘤成为人类致死的主要疾病。世界卫生组织国际癌症研究中心(IARC/WHO)的最新数据显示恶性肿瘤在全球的发病率呈上升趋势，2008年760万人死于恶性肿瘤，其中64％发生在发展中国家。在我国，肿瘤防治面临的形势也极为严峻，最新报告显示，在过去30年间，我国恶性肿瘤的发病率和死亡率均呈明显上升趋势；据预测，在未来20-30年间，我国恶性肿瘤发病率和死亡率不断上升的趋势将继续维持。因此，对肿瘤的研究是生命科学和医学领域的持续研究热点之一。

恶性肿瘤传统疗法如放疗、化疗和手术治疗的局限性促使人们寻找新的抗肿瘤方法。随着对肿瘤发生发展分子机制认识的深入，人们已意识到肿瘤是一种基因病，纠正发生缺陷的基因可为肿瘤的治疗提供新的希望。近年来发展了许多针对肿瘤的基因治疗方法的研究，但迄今为止进入临床应用的几种基因药物的临床疗效有限，且具有潜在的、长期的、延迟的副作用，因此，寻求治疗的新靶点和开发新的基因治疗方法已成为国内外肿瘤基因治疗的研究方向。

RNA干扰(RNA interference，RNAi)是一门基因阻断技术，为一种双链RNA(double-stranded RNA，dsRNA)分子在mRNA水平上阻断特异基因的表达或使其沉默的过程，即序列特异性的转录后基因沉默(Post-transcriptional gene silencing，PTGS)。近年来，RNAi已成为肿瘤基因治疗的有效策略。利用RNAi技术可以抑制原癌基因、突变的抑癌基因、细胞周期相关基因、抗凋亡相关基因等表达来抑制肿瘤的发生和发展。

GINS2是DNA复制复合体GINS家族成员之一，位于人染色体16q24上，其mRNA长度为1196bp，编码相对分子质量为21000的蛋白质。GINS是一种复制解旋酶，在移动到复制叉前打开DNA双链。研究表明，GINS家族成员在癌症的发生中起一定作用，如GINS家族成员在侵袭性黑色素瘤中过表达，也有文献表明，DNA复制相关蛋白在不同细胞中有不同的作用，如在决定中心体复制数量和疾病发生的不同阶段方面，GINS均发挥了一定功能，特别是与染色体的分离密切相关。

而目前关于GINS2在肿瘤相关领域的报道很少。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供GINS2基因或蛋白的抑制剂的新用途。

本发明提供了GINS2基因或蛋白的抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。

作为一种具体实施方式，所述的抑制剂选自以GINS2蛋白或其转录本为靶序列、且能够抑制GINS2蛋白表达或基因转录的siRNA、dsRNA、shRNA、miRNA、反义核酸；或能表达或形成所述siRNA、dsRNA、miRNA、反义核酸的构建物。

作为一个优选例，所述的抑制剂选自下列中的一种：

a)siRNA，所述siRNA的靶序列如SEQ ID NO.1所示；

b)shRNA，所述shRNA的编码序列正义链如SEQ ID NO.5所示，反义链如SEQ IDNO.6所示；