[发明专利]一种甲基纤维素和柠檬酸三钠双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法

权利要求书

1.一种甲基纤维素和柠檬酸三钠双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)制备藻蓝蛋白粗提取液：用去离子水清洗新鲜的螺旋藻2-4次，洗涤干净的螺旋藻，经压力为210-420kg/cm²的高压细胞匀浆机，破碎时间为5-6min，超声波处理时间为12-14min，将破碎的螺旋藻悬浊液于离心机中，离心时间为10-18min，离心收集上清液，制得含藻蓝蛋白的粗提液于4-5℃下储存；

(2)双水相萃取：向步骤(1)所得含藻蓝蛋白的粗提液中加入甲基纤维素和柠檬酸三钠，震荡混合时间为1-2h，静置分相，藻蓝蛋白富集于上相；

(3)采用膜孔径为3-5um的滤膜对藻蓝蛋白粗提液进行粗过滤，处理时间为20-26小时，再于-10--12℃冷冻干燥10-12小时，制得双水相萃取藻蓝蛋白。

2.根据权利要求1所述甲基纤维素和柠檬酸三钠双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法，其特征在于：在步骤(1)中，所述离心速率为800-1000r/min。

3.根据权利要求1所述甲基纤维素和柠檬酸三钠双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法，其特征在于：在步骤(2)中，所述甲基纤维素的质量为双水相体系总质量的9-13％。

4.根据权利要求1所述甲基纤维素和柠檬酸三钠双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法，其特征在于：在步骤(2)中，所述柠檬酸三钠为双水相体系总质量的17-25％。

5.根据权利要求1所述甲基纤维素和柠檬酸三钠双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法，其特征在于：在步骤(2)中，含藻蓝蛋白的粗提液的质量为双水相体系总质量的65-70％。

6.根据权利要求1所述甲基纤维素和柠檬酸三钠双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法，其特征在于：在步骤(3)中，所述滤膜的流速为150mL/min，渗透通量为60L/(h·m²)。