[发明专利]一种磷酸盐缓冲液及其制备方法

说明书

本发明公开了一种磷酸盐缓冲液的配制方法，在所述5L浓缩液磷酸盐缓冲液中，包括：磷酸二氢钾，其添加浓度为0.55wt％；二水合磷酸氢二钠，其添加浓度为2.37—2.38wt％；氯化钾，其添加浓度为1.50wt％；硝酸钠，其添加浓度为0.19％—0.20wt％；二水合依地酸二钠，其添加浓度为0.38—0.40wt％；TritonX‑100，其添加浓度为0.05—0.055wt％，所述溶剂为水。本发明的缓冲液在配置过程不会产生大量泡沫；且工艺简单操作，效率提高很多，易于控制其PH值和电导率。

技术领域

本发明涉及一种磷酸盐缓冲液及其制备方法。

背景技术

浓缩液主要成分是磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline)一般作为溶剂，起溶解保护试剂的作用。它是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液，主要成分为Na2HPO4.2H2O、KH2PO4、NaNO3、KCl，TritonX-100等，作为体外诊断试剂所用的10倍浓缩液，所以研究其技术指标主要涉及的是PH值和电导率(电导率间接反映溶液的渗透压，因为渗透压取决于溶质的分子数)，再根据相关技术，发现PH值在6.8-7.3，电导率在42-44ms/cm范围的10倍浓缩液稀释成稀释液测试血糖和乳酸得出的测试结果更加符合标准，并且CV≤2.0％。市场上磷酸盐缓冲溶液配置工艺，生产的缓冲溶液渗透压可以达到280-320smolL，PH值可以达到7.1-7.2，一般用于葡萄糖/乳酸分析仪、分子克隆及细胞培养，pH＝7.4，与人体血液等渗细胞内外液之间保持着一个平衡等渗状态，而一方出现异常，将会打破内环境的稳态，对测试结果就会产生不利影响。渗透压是调节细胞内外体液环境稳定的重要因素，其高低变化可以直接影响机体的生理功能和代谢活动，因此对于试剂研究员来说，配液过程中及时考虑每个试剂本身对渗透压的影响，在符合国家标准的过程中，向临床提供等渗的溶液，以尽可能的避免用药异常现象发生。

再者配置浓缩液中需要用到的tritonX-100和Parmetol K40，也是溶液中必须的两种有机化合物，对于这两中化学试剂的添加工艺，结果实验室多次研发确认，再结合国外给出的一些技术支持，确定在完全溶解磷酸二氢钾，二水合磷酸氢二钠，氯化钾，硝酸钠，二水合EDTA-2Na后，搅拌转速设定120-150转/分钟，搅拌频率设定为40-50HZ，匀速搅拌下，先缓慢滴加0.05％-0.055％的TritonX-100，待其完全溶解后，再缓慢逐滴加入5.00mL-6.00ml左右的K40，最后加超纯水至5L刻度线处，继续搅拌30min，得到灌装前的浓缩液，进而稀释成稀释液与血细胞正常状态下的pH值、渗透压一致，维持渗透压、酸碱平衡，进而测试得到的数据更加具有说服力。

发明内容

本发明包含一种磷酸盐缓冲液，在5L浓缩液磷酸盐缓冲液中，包括：磷酸二氢钾，其添加浓度为0.55wt％；二水合磷酸氢二钠，其添加浓度为2.37—2.38wt％；氯化钾，其添加浓度为1.50wt％；硝酸钠，其添加浓度为0.19％—0.20wt％；二水合依地酸二钠，其添加浓度为0.38—0.40wt％；TritonX-100，其添加浓度为0.05—0.055wt％，所述溶剂为水。

优选地，所述缓冲液还包含ParmetolK40。

优选地，所述溶剂为超纯水。

本发明还公开了一种制备上述缓冲液的工艺方法，包含以下技术特征：

(1)装3L水于5L量杯中，将量杯置于磁力搅拌器上，让所述磁力搅拌器内的搅拌转子匀速转动；

(2)依次向5L量杯中加入磷酸二氢钾，二水合磷酸氢二钠，氯化钾，硝酸钠，二水合依地酸二钠，直至上述原材料完全溶解后搅拌下加入TritonX-100；溶解上述的所有无机盐应该预先准备溶剂体积的60％预先溶解，方可避免泡沫的产生；二水合依地酸二钠，其添加浓度为0.38—0.40wt％，根据发明人的大量实验得出，加入上述百分含量抗凝效果最优，该范围以外将会使溶液凝聚；

(3)等上述原材料都完全溶解后，然后再向5L量杯中加满水至刻度线处；